Standard “Kaedah ujian halangan membran in vitro OECD TG 435 untuk kerengsaan kulit” yang diterbitkan di bawah garis panduan OECD mengenai kelakuan perniagaan yang bertanggungjawab untuk syarikat multinasional (garis panduan OECD) menerangkan kaedah ujian halangan membran in vitro yang digunakan untuk mengenal pasti bahan kimia yang menghakis. Kaedah ujian ini menggunakan membran buatan yang direka bentuk untuk bertindak balas terhadap bahan kimia menghakis dengan cara yang sama dengan kulit haiwan.
Kaedah ujian halangan membran in vitro boleh digunakan untuk menguji pepejal, cecair dan emulsi. Walau bagaimanapun, bahan berair dengan nilai pH dalam julat 4,5 hingga 8,5 secara amnya tidak sesuai untuk ujian.
Kaedah ujian yang diterangkan membolehkan pengecaman bahan kimia dan campuran yang menghakis dan subkategori bahan menghakis seperti yang dibenarkan dalam sistem pengelasan dan pelabelan bahan kimia yang diselaraskan secara global. Pengelasan ini adalah berdasarkan masa penembusan bahan melalui penghalang membran.
Sistem ujian ini terdiri daripada dua komponen:
Apabila menggunakan sistem ujian ini, bilangan replika yang sesuai disediakan untuk setiap bahan ujian dan kawalan yang sepadan dengannya. Masa penggunaan bahan ujian pada penghalang membran direkodkan dan berperingkat. Masa (dalam minit) antara penggunaan bahan ujian pada penghalang membran dan penembusan halangan digunakan untuk menentukan kekakisan bahan ujian.
Kekakisan kulit secara tradisinya ditentukan dengan menggunakan bahan kimia ujian pada kulit haiwan hidup dan menilai tahap kerosakan tisu selepas tempoh masa tertentu. Selain piawaian OECD TG 435, beberapa kaedah ujian in vitro lain telah diterima pakai sebagai alternatif kepada prosedur kulit arnab in vivo standard (OECD TG 404) yang digunakan untuk mengenal pasti bahan kimia yang menghakis. Garis panduan OECD mengesyorkan penggunaan kaedah ujian in vitro yang disahkan dan diterima.
Dalam pendekatan modular ini, keputusan positif daripada kaedah ujian in vitro digunakan untuk mengklasifikasikan bahan kimia sebagai menghakis tanpa memerlukan ujian haiwan. Dengan cara ini, ia bertujuan untuk mencegah penggunaan haiwan dalam ujian dan untuk mengelakkan kesakitan dan kesusahan yang mungkin timbul jika haiwan digunakan untuk tujuan ini.
Kaedah ujian ini mengesan kerosakan penghalang membran yang disebabkan oleh bahan kimia ujian menghakis apabila bahan kimia ujian digunakan pada permukaan penghalang membran makromolekul sintetik melalui "sistem pengesanan kimia," mungkin oleh mekanisme kerengsaan yang sama yang beroperasi pada kulit hidup.
Penembusan atau pecahnya penghalang membran boleh diukur dengan beberapa prosedur atau sistem pengesanan kimia, termasuk perubahan dalam warna pewarna penunjuk pH atau sifat lain larutan penunjuk di bawah penghalang.
Ia mesti ditentukan bahawa penghalang membran adalah sah untuk kegunaan yang dimaksudkan, iaitu, relevan dan boleh dipercayai. Ini termasuk memastikan bahawa penyediaan yang berbeza adalah konsisten dari segi sifat penghalangnya, contohnya dapat mengekalkan penghalang terhadap bahan kimia tidak menghakis, dapat mengkategorikan sifat menghakis bahan kimia antara subkategori kehakisan sistem yang diharmonikan secara global untuk pengelasan dan pelabelan bahan kimia. Pengelasan yang diberikan adalah berdasarkan masa yang diambil untuk bahan kimia melintasi penghalang membran dan menembusi ke dalam larutan penunjuk.
Sebelum penggunaan rutin kaedah ujian halangan membran in vitro, makmal mesti mematuhi piawaian ini dan menunjukkan kecekapan teknikal mereka dengan mengklasifikasikan bahan kelayakan yang dicadangkan dengan betul. Jika bahan tersenarai tidak tersedia atau dibenarkan, bahan lain yang mempunyai data rujukan in vivo dan in vitro yang mencukupi boleh digunakan.
Ujian mesti dijalankan pada suhu ambien (julat 17-25 darjah) dan komponen mesti mematuhi syarat yang dinyatakan dalam piawaian.
Sebelum melakukan ujian penghalang membran, ujian keserasian kimia dilakukan untuk menentukan sama ada bahan kimia ujian dapat dikesan oleh sistem pengesanan kimia. Jika sistem pengesanan kimia tidak mengesan bahan kimia ujian, kaedah ujian penghalang membran tidak sesuai untuk menilai potensi kekakisan bahan kimia ujian tersebut dan kaedah ujian yang berbeza harus digunakan. Sistem pengesanan kimia dan keadaan pendedahan yang digunakan untuk ujian keserasian harus mencerminkan pendedahan dalam ujian halangan membran berikutnya.
Jika sesuai untuk kaedah ujian, bahan kimia ujian yang layak melalui ujian keserasian hendaklah tertakluk kepada ujian kategori skala masa, iaitu ujian saringan untuk membezakan antara asid atau bes lemah dan kuat. Sebagai contoh, dalam kaedah ujian rujukan yang disahkan, ujian pengkategorian skala masa digunakan untuk menunjukkan dua skala masa yang harus digunakan bergantung pada sama ada rizab asid atau alkali yang ketara dikesan. Bergantung pada rizab asid atau alkali bahan kimia ujian, dua skala masa terobosan yang berbeza harus digunakan untuk menentukan kekakisan dan sistem yang diselaraskan secara global untuk pengelasan dan pelabelan subkategori kekakisan kulit bahan kimia.
Penghalang membran terdiri daripada dua komponen: gel berair makromolekul protein dan membran penyokong telap. Gel berprotein hendaklah tidak telap kepada cecair dan pepejal tetapi boleh dihakis dan dibuat telap. Penghalang membran yang dibina sepenuhnya mesti disimpan di bawah keadaan yang telah ditetapkan yang telah ditunjukkan untuk mengelakkan degradasi gel, seperti pengeringan, pertumbuhan mikrob, ricih atau retak, yang akan merendahkan prestasinya. Tempoh penyimpanan yang boleh diterima hendaklah ditentukan dan persediaan penghalang membran tidak boleh digunakan selepas tempoh ini. Membran penyokong telap memberikan sokongan mekanikal kepada gel berprotein semasa proses penggelapan dan pendedahan kepada bahan kimia ujian. Membran penyokong hendaklah menghalang gel daripada kendur atau beralih dan hendaklah mudah telap kepada semua bahan kimia ujian.
Dari segi sistem pengesanan kimia, penyelesaian penunjuk, yang merupakan penyelesaian yang sama digunakan untuk ujian keserasian, mesti bertindak balas terhadap kehadiran bahan kimia ujian. Pewarna penunjuk pH atau gabungan pewarna, seperti merah kresol dan oren metil, harus digunakan, yang akan menunjukkan perubahan warna sebagai tindak balas kepada kehadiran bahan kimia ujian.
Di antara pelbagai kajian ujian, pengukuran, analisis dan penilaian yang disediakan untuk perniagaan dalam pelbagai sektor, organisasi kami juga menyediakan perkhidmatan ujian yang ditakrifkan dalam piawaian "Kaedah ujian halangan membran in vitro OECD TG 435 untuk kerengsaan kulit", dengan kakitangan terlatih dan pakar. dan peralatan teknologi canggih.
Anda boleh meminta kami mengisi borang kami untuk mendapatkan temujanji, mendapatkan maklumat terperinci atau meminta penilaian.
