EN ISO 16472 Hayvan Yemleri - Amilazla İşlenmiş Nötr Deterjan Lif İçeriğinin (aNDF) Belirlenmesi

Temeli bir Avrupa standardı olan ve sonrasında Uluslararası Standartlar Teşkilatı (ISO) tarafından yayınlanan “EN ISO 16472 Hayvan yemleri - Amilazla işlenmiş nötr deterjan lif içeriğinin (aNDF) belirlenmesi” standardında, her türlü hayvan yeminde amilazla işlenmiş nötr deterjan çözünmeyen lifli kalıntı içeriğinin belirlenmesine yönelik yöntemler açıklanmaktadır. Bu standart bir gravimetrik rutin yöntemi ve bir referans yöntemi içerir.

Bu standardın amaçları doğrultusunda, amilazla işlenmiş nötr deterjan lif içeriği (aNDF içeriği), bu standartta belirtilen prosedürle belirlenen çözünmeyen lif kalıntılarının kütle kesrini ifade eder. aNDF içeriği kütlece yüzde olarak ifade edilir.

Prensip olarak nötr deterjan (ND) çözeltisi ve ısıya dayanıklı alfa-amilaz, yemlerdeki kolay sindirilebilen proteinleri, lipitleri, şekerleri, nişastaları ve pektinleri çözmek için kullanılır ve geriye, bitkisel materyallerin (selüloz, hemiselüloz ve lignin) hücre duvarı bileşenleri olan ve hayvansal ürünlerde sindirilemeyen azotlu maddelerden oluşan çözünmeyen lifli bir kalıntı bırakır.

Bu testlerde genelde her zamanki laboratuvar cihazları yanı sıra özellikle şu ekipman kullanılır:

• 0,1 mg’a en yakın tartım yapabilen, 0,1 mg okunabilirliğe sahip analitik terazi.
• 220 µm ila 260 µm geometrik ortalama parçacık boyutu elde etmek için numuneleri öğütebilen 2 mm elekli siklon değirmeni veya 1 mm elekli kesici değirmen
• 600 ml’lik kaplara uyan, ayrı ısıtma üniteleri ve soğuk su kondansatörleri olan geri akış cihazı. Ham elyaf tayinleri için uygun olan herhangi bir geleneksel cihaz kabul edilebilir. Soğuk su kondansatörleri kullanıldığında 50 ml suyun 4 ila 5 dakika içinde kaynaması için ısıtma ünitesi ayarları kalibre edilir. Bir Fibertec tipi cihaz kullanılabilir ve 50 ml suyu 10 dakika içinde kaynatmalıdır.
• Fritli diskli Gooch pota, iri gözenekli pota (gözenek boyutu 40 µm ila 60 µm), yüksek form, 40 ml ila 50 ml kapasite veya P2 (gözenek boyutu 40 µm ila 100 µm), 26 ml ila 28 ml kapasite.

Yeni potaları ve külü 1 saat boyunca 500 derecede temizlenir. Her kullanımdan sonra potalar 3 saat boyunca 500 derecede küllenerek, külü çıkarılarak, deterjan solüsyonunda ters çevrilerek ve 7 ila 10 dakika boyunca sonikasyon uygulayarak temizlenir. Potalar sıcak suda durulanır ve en az 30 dakika boyunca oda sıcaklığındaki suda bekletilir. Her potanın üstüne bir tuzak ve vakum hattına bağlı bir portla donatılmış lastik bir tıpa takılır. Her potayı tekrar tekrar suya daldırıp çıkararak suyla geri yıkanır ve kuvvetli bir durulama etkisi yaratılır. Filtrasyon oranı ara sıra kontrol edilir. Temizleme filtrasyon hızını iyileştirmezse pota atılır.

• Lifli kalıntıların yeterli şekilde ıslatılmasına izin veren vakum filtre manifoltu (örneğin Fibertec tipi). Manifolt, vakum hatlarında köpük oluşumunu azaltmak için pota ile vakum geçirmez bir conta sağlamalıdır. Manifoltu bir tuzağa ve vakum kaynağına bağlamak için kalın duvarlı vakum boruları kullanılır. Köpüğü çıkarmak için yeterli vakum kapasitesi sağlamak amacıyla tuzak ile vakum kaynağı arasında bir vakum haznesi önerilir.
• Sürekli bir kaynar su jeneratörü veya uygun bir alternatif kullanılır. Cihaz, bir seferde yıkanan tüm numuneler için yeterli miktarda kaynar su (en az 95 derece) sağlamalı ve ince bir akım üreten bir nozul aracılığıyla (10 saniyede 35 ml ila 40 ml akış hızı, 2,5 ml tek kullanımlık plastik pipet ucu kabul edilebilir bir nozul oluşturur) beslemelidir. İnce bir nozul, parçacıkları potaya aktarmak için gereken suyu en aza indirir, ancak şişenin kenarına yapışan kalıntıları çıkarmak için gereken su basıncını sağlar. Özellikle nişasta, pektin maddeleri, musilaj veya gliko-protein içeren numuneler için, potalara su eklendiğinde suyun kaynaması kritik önem taşır. Fibertec tipi cihaz için, kondansatörleri durulamak için koni püskürtme nozullu bir şırınga ve kondansatörlere yapışan kalıntıları çıkarmak için 10 cm uzunluğunda 12 gösterge iğneli 60 ml tek kullanımlık bir şırınga kullanılır.

Numune alma bu standartta belirtilen yöntemin bir parçası değildir. Önerilen bir örnekleme yöntemi ISO 6497 standardına yer almaktadır. Laboratuvarın gerçekten temsili olan ve taşıma veya depolama sırasında hasar görmemiş veya değiştirilmemiş bir örnek alması önemlidir.

Test örneklerini ISO 6498 standardına uygun olarak hazırlanır. Örnek saklama ve öğütme kolaylığı için örnekler hava ile kurutulmalıdır (yaklaşık yüzde 90 kuru madde). Yapay elyaf oluşumunu önlemek için ıslak örnekler en fazla 60 derecede kurutulur. Ekstraksiyondan sonra kalan kalıntı miktarı, örneğin parçacık boyutundan etkilenir. 220 µm ila 260 µm geometrik ortalama parçacık boyutu elde etmek için temsili örnekler öğütülür.

Yıllardır çok geniş bir yelpazede gerçekleştirdiği test, ölçüm, analiz ve değerlendirme çalışmaları ile her sektörden işletmelere destek olmaya çalışan kuruluşumuz, bilim ve teknoloji alanında dünyada yaşanan gelişmeleri yakından takip eden ve sürekli kendini geliştiren güçlü bir çalışan kadrosuna sahiptir. Bu çerçevede işletmelere “EN ISO 16472 Hayvan yemleri - Amilazla işlenmiş nötr deterjan lif içeriğinin (aNDF) belirlenmesi” standardına uygun test hizmetleri de verilmektedir.