За тестови за биокомпатибилност за кои е потребна генотоксичност, ние нудиме повеќе типови тестови, вклучително и мутагеност на Ејмс, хромозомска аберација, лимфом на глувче и микронуклеус на глувче, во зависност од видот на производот и побарувањата за податоци. Овие тестови се во согласност со упатствата на ОЕЦД и ИСО како едно од трите ин витро нивоа на тестови за генотоксичност.
Тестот за мутагеност на Амес се користи за да се утврди потенцијалната мутагена активност на екстракт од медицински уред / материјал. Тестот за бактериски обратна мутација (тест на Амес) се изведува како дел од тестовите за геноксиксичност на тестовите за да се утврди дали протекување од медицински уред / материјал се мутагени.
Тестот за хромозомска аберација се користи за скенирање на медицински помагала / материјали за да се утврди дали тие предизвикуваат структурни хромозомски абнормалности во клетките на јајниците на кинески хрчак (CHO). Тестот се изведува на уреди / материјали со постојан контакт на пациентот, продолжен контакт на пациентот или контакт со крв. Тестот за хромозомска аберација е во согласност со упатствата на ОЕЦД и ИСО како едно од трите нивоа на ин витро тестирање за генотоксичност.
Тестирањето на лимфом на глувчето често користи култури на клетки на цицачи за да се идентификуваат гени мутации, промена во структурата и бројот на хромозомите и други гени токсичности предизвикани од медицински помагала, материјал или екстракти. Овие тестови се користат за да се осигури дека уредите кои имаат долгорочен контакт со организмот не откриваат генотоксичност што може да доведе до генетски мутации потенцијални од карцином.
Анализата на микронуклеусот на глувчето се користи за да се процени потенцијалот на медицински уред за да се предизвика микронуклеус формирање кај незрели полихроматски еритроцити кои се наоѓаат во коскената срцевина на глувци за возрасни.
Амес мутагеност
Тестот за мутагеност на Амес користи неколку видови на Salmonella typhimurium избрани за нивна подложност на мутација заради:
Тестните соеви исто така бараат хистидин за раст како резултат на мутација на генот што го контролира производството на хистидин. Амисовите тестови се изведуваат со мешање на екстракт од испитната супстанција со испитниот организам во раствор на мек агар кој содржи само мала количина хистидин. Хистидин дозволува инокулираниот тест организам да влезе во ограничен број оддели, но е недоволен за да се овозможи нормален раст.
Меѓутоа, ако вирусот е подложен на обратна мутација (спонтана или предизвикана од тест-супстанција или позитивен контролен материјал), организмот повеќе не бара хистидин да расте и може да произведе видлива колонија или реверс. Мутации на тест организмот само во регионот на хистидин гените предизвикуваат организмот на тестот да ја промени мутацијата во организмот, за што повеќе не е потребен хистидин.
Тестните соеви се избрани за откривање на разни видови мутагени. Тестовите соеви што се користат се TA97A, TA98, TA100, TA102 и TA1535. Исто така, се изведува тест на самото место во кој екстрактите од производот за испитување се обоени на плоча која содржи мала количина на тест организам што содржи хистидин. Бидејќи пробната супстанција се шири низ агарот, таа станува се повеќе разредена. Ова овозможува откривање на мутагени кои предизвикуваат одредена инхибиција на тестовите на тестерот. Тестовите се прават со активирање на S-9 или без активирање на S-9. Системот за активирање на S-9 е дизајниран да симулира системи на ензимски црн дроб кај цицачи и се користи за откривање на супстанции подложени на метаболичко активирање од немутагени форми.
Тестот за хромозомски аберација се изведува со изложување на CHO клетките на екстрактот од супстанцијата за тестирање. Крвен медиум е вклучен во анализата како негативна контрола.
CHO-клетките се семенуваат во колби со клеточна култура од 75 cm 2 и се инкубираат со медиум на клетка + 10% серум до 40-60% слив.
CHO клетките се изложени на екстракт од производот за тестирање во присуство и отсуство на систем за активирање на метаболизмот. Системот за метаболичко активирање е мешавина од S9 хомогени, изоцират и NADP. Позитивни контроли што се користат се циклофосфамид со метаболичко активирање и Митомицин Ц без метаболичко активирање.
Пред бербата на клетките, клетките се испитуваат за цитотоксичност. Вијалите се бодуваат според степенот на разликувана морфолошка цитотоксичност на релативна скала од 10993 - 5 според AAMI / ANSI / ISO 87-0 и USP <4>. Просекот на резултатите од трите шишиња е просечен за да се даде конечен резултат на цитотоксичност.
На крајот на периодите на изложеност и експресија, клетките се апсат на метафаза со колтазид. Потоа клетките се вадат од ампулите и се третираат со хипотоничен раствор и фиксатор. Клетките се депонираат на слајдовите на микроскопот. Хромозомите се обоени со Giemsa дамка и покриени со Permount®. Потоа клетките се испитуваат микроскопски за хромозомски абнормалности.
Биокомпатибилност Во тестот за генотоксичност, клетките на глувчето-лимфом се користат за да се утврди дали тест-материјалот е способен да предизвика точки на мутации или кластоген (хромозомно кршење) во култивирана клеточна линија на цицачи. Во овој случај, целниот ген, тимидин киназа (ТК), е ген што може да се дистрибуира. Губење на активноста на ТК укажува на тоа дека настанала мутација. Бидејќи ТК е вклучен во патека за спасување добиена од ДНК метаболизам, клетките можат да синтетизираат тимидин ново. Затоа, загубата на ТК не ја прави клетката нежива.
Може да бидат избрани мутанти и фреквенциите на мутантот можат да бидат изведени со вклучување на тимидин аналог (трифлуоротимидин или TFT) во медиумот на културата на клетките по изложеноста на материјалот за испитување. Редовните клетки со недопрена ТК вклучуваат аналогни и урнеци; Мутантните клетки (немаат активност на ТК) преживуваат, формираат колонии и се квантифицираат.
Во тестот глувче микронуклеус, медицински уред е отстранет во поларна и непаларна околина. Позитивни контроли на екстракт од тест производ и негативни контроли се администрираат на 20 ml / kg кај машки и женски глувци. Коскената срцевина потоа се бере 24 и 48 часа по дозирањето и се испитува за присуство на микронуклеарни полихроматски еритроцити (ПЦЕ). Присуството на ЈКП е индикација за истекување на мутагени супстанции од уредот.
EUROLAB, со својот високо стручен тим и меѓународно акредитирани лаборатории, Тест на генотоксичност Ги извршува сите тестирања, анализи, мерења, евалуации и известува за производство на услуги комплетно и сигурно.
Можете да побарате од нас да ја пополните нашата форма за да закажете состанок, да добиете подетални информации или да побарате проценка.
