ASTM E2197-17 Štandardná kvantitatívna testovacia metóda diskového nosiča na stanovenie baktericídnych, virucídnych, fungicídnych, mykobaktericídnych a spoicídnych aktivít chemikálií

V štandarde „ASTM E2197-17 Štandardná kvantitatívna testovacia metóda diskového nosiča na stanovenie baktericídnych, virucídnych, fungicídnych, mykobaktericídnych a spoicídnych aktivít chemikálií“ vyvinutom Americkou spoločnosťou pre testovanie a materiály (ASTM) predstavuje brúsená nehrdzavejúca oceľ tvrdú, ne -pórovité povrchy prostredia a zdravotnícke pomôcky Na vyhodnotenie schopnosti inaktivovať vegetatívne baktérie, vírusy, plesne, mykobaktérie a bakteriálne spóry na nosičoch diskov. Je opísaná použitá testovacia metóda.

Táto norma je tiež navrhnutá tak, aby sa osoby, ktoré prežili, porovnávali s priemerom najmenej troch kontrolných nosičov, aby sa zistilo, či bola splnená výkonnostná norma. Na správne štatistické vyhodnotenie výsledkov musí byť počet životaschopných organizmov v testovacom inokulu dostatočne vysoký na to, aby zohľadnil výkonnostný štandard a experimentálne odchýlky vo výsledkoch. Okrem toho táto testovacia metóda nezahŕňa žiadne utieranie alebo trenie. Preto nie je určený na testovanie vymazaní.

Na účely tejto normy platia okrem termínov a definícií v „štandardnej terminológii ASTM E2756-19 pre antimikrobiálne a antivírusové látky“ tieto definície:

• Nosič označuje neživý povrch alebo predmet naočkovaný testovacím organizmom.
• Eluát sa týka eluátu obsahujúceho regenerovaný organizmus alebo organizmy.
• Eluant je akýkoľvek roztok, ktorý je neškodný pre testovaný organizmus alebo organizmy a pridáva sa do nosiča na regeneráciu organizmu alebo organizmov.
• Neutralizácia sa týka procesu potlačenia antimikrobiálnej aktivity testovanej látky. To možno dosiahnuť zriedením alebo pridaním jedného alebo viacerých chemických neutralizátorov do zmesi organizmov alebo testovaných látok.
• Pôdna záťaž je roztok jednej alebo viacerých organických alebo anorganických látok, prípadne oboch, pridaných do suspenzie testovaného organizmu na simuláciu prítomnosti telesných sekrétov, exkrécií alebo iných cudzích látok.
• Testovaný organizmus je organizmus, ktorý má vlastnosti, ktoré umožňujú jeho ľahkú identifikáciu. Môže sa tiež nazývať náhradný, simulačný alebo markerový organizmus.
• Testovaná látka je prípravok obsahujúci antimikrobiálne zložky.

Každý disk (priemer 1 cm) obsahuje 10 µl testovaného organizmu so záťažou pôdy. Inokulum sa vysuší a disk sa potom umiestni na vnútorný spodný povrch sterilnej plastovej liekovky pred kontaktovaním 50 ul použitého riedenia testovanej látky. Čas kontaktu a teplota sa môžu meniť podľa potreby. Kontrolné nosiče dostanú 50 µl kvapaliny, ktorá je neškodná pre testované organizmy a hostiteľské bunky, ak je prítomná, ale inak sa s ňou zaobchádza rovnakým spôsobom ako s testovacími nosičmi.

Pri testoch proti vegetatívnym baktériám, hubám, mykobaktériám a spóram baktérií sa potom testovaná látka neutralizuje a inokulum sa eluuje. Eluát a následné premytia nosiča a liekovky prechádzajú cez membránový filter. Filtračné kultivačné platne sa inkubujú, spočítajú sa kolónie a vypočítajú sa log10 redukcie.

Pri vírusových testoch sa vhodné riedenia eluátu inokulujú do vhodných bunkových kultúr, kultúry sa vyšetria na cytopatológiu/infekčné ložiská, ktoré sa odhadujú ako najpravdepodobnejší počet alebo sa počítajú ako ložiská alebo plaky, a vypočíta sa log10.

Dizajn tohto testu eliminuje akúkoľvek stratu životaschopných organizmov premývaním, a tak umožňuje získať štatisticky platné údaje s použitím oveľa menšieho množstva testovacích nosičov, ako by bolo potrebné pre metódy založené na jednoduchých odhadoch počtu s najvyššou pravdepodobnosťou.

Prísnosť testovania sa dosahuje použitím znečistenia, mikrotopografie povrchu nosiča z brúsenej nehrdzavejúcej ocele a menšieho pomeru testovanej látky k ploche povrchu, ktorý je typický pre mnohé aplikácie dezinfekčných prostriedkov. Testovaná látka, ktorá sa má hodnotiť, teda čelí primeranej výzve, pokiaľ ide o umožnenie účinnej regenerácie testovaných organizmov z naočkovaných nosičov. Kovové disky v základnom teste sú tiež kompatibilné so širokou škálou účinných látok.

Konštrukcia nosičov umožňuje do každého umiestniť presne odmeraný objem testovaného organizmu (10 µl) a kontrolnej tekutiny alebo testovanej látky (50 µl).

Inokulum sa umiestni do stredu každého disku, pričom objemy testovanej látky pokrývajú takmer celý povrch disku, čím sa prakticky eliminuje riziko expozície akýchkoľvek organizmov.

Vo všetkých testoch okrem testov proti vírusom, pridanie 10 ml eluentu/riedidla poskytuje 1:200 riedenie testovanej látky ihneď na konci doby kontaktu. Zatiaľ čo tento krok sám o sebe postačuje na zastavenie mikrobicídnej aktivity väčšiny aktívnych látok, testovací protokol umožňuje v prípade potreby pridanie špecifického neutralizátora do eluentu/riedidla. S výnimkou vírusov umožňuje krok membránovej filtrácie aj spracovanie celého eluátu z testovacích nosičov, a tým zachytenie a následnú detekciu aj malého počtu živých organizmov, ktoré môžu byť prítomné. Následné prepláchnutie membránových filtrov fyziologickým roztokom tiež znižuje riziko zanesenia akýchkoľvek zvyškov inhibítora do regeneračného média.

Medzi početnými testovacími, meracími, analytickými a hodnotiacimi štúdiami, ktoré naša organizácia poskytuje pre podniky v rôznych sektoroch, so svojím vyškoleným a odborným personálom a pokročilým technologickým vybavením, patrí „štandardný kvantitatívny disk ASTM E2197-17 na určenie baktericídneho, virucídneho, fungicídneho, mykobaktericídneho a spoicídne aktivity chemikálií“ Poskytuje tiež testovacie služby definované v norme „metóda testovania nosičov“.