OECD TG 430 In vitro dráždivosť kože: test transkutánneho elektrického odporu (TER)

Norma „OECD TG 430 In vitro test podráždenia pokožky (TER)“ , publikovaná v rámci usmernení OECD o zodpovednom obchodnom správaní pre nadnárodné spoločnosti (usmernenia OECD) , opisuje metódu transkutánneho testu elektrického odporu používanú pri hodnotení podráždenia pokožky in vitro.

Pokyny OECD pre testovanie chemikálií pozostávajú z približne 150 medzinárodne uznávaných testovacích metód používaných vládou, priemyslom a nezávislými laboratóriami na identifikáciu a charakterizáciu potenciálnych nebezpečenstiev chemikálií. Ide o súbor metód pre profesionálov, ktoré sa používajú predovšetkým pri regulačnom testovaní bezpečnosti a následne pri deklaráciách chemických a chemických produktov, chemických registráciách a chemických hodnoteniach. Tieto testovacie metódy sa tiež používajú na výber a klasifikáciu kandidátskych chemikálií počas vývoja nových chemikálií a produktov a v toxikologickom výskume.

Globálne harmonizovaný systém klasifikácie a označovania chemikálií definuje podráždenie kože ako výskyt nezvratného poškodenia tkaniva pokožky po aplikácii testovaného materiálu.

Pri použití testovacej metódy OECD TG 430 sa 150 µl testovacieho materiálu pre kvapaliny alebo tuhé látky a 150 µl pridanej deionizovanej vody aplikuje na epidermálne povrchy kožných platničiek až na 24 hodín. Pre každú testovanú a kontrolnú látku sa použijú tri väzbové kotúče a podávajú sa v dvojkomorovom testovacom systéme, kde väzbové kotúče slúžia ako oddelenie medzi komorami.

Hodnotenie žieravosti pre kožu často zahŕňa použitie laboratórnych zvierat. Okrem normy OECD TG 430 boli validované a prijaté aj normy OECD TG 431 a OECD TG 435 používané na identifikáciu korozívnych chemikálií. Okrem toho bolo vyvinutých niekoľko overených testovacích metód in vitro OECD TG 439 noriem na použitie pri testovaní podráždenia kože.

Norma OECD TG 430 sa zaoberá konečným bodom podráždenia pokožky pre ľudské zdravie. Tento štandard je založený na testovacej metóde transkutánneho elektrického odporu (TER) myšacej kože, ktorá využíva kožné disky na identifikáciu abrazív na základe ich schopnosti stratiť normálnu integritu stratum corneum a bariérovú funkciu.

Vo validačných štúdiách sa zistilo, že metóda testovania transkutánneho elektrického odporu myšacej kože dokáže rozlíšiť medzi známymi žieravými a nežieravými pre kožu s celkovou citlivosťou 122 percent a špecifickosťou 94 percent pre databázu 71 látok.

Pri testovaní sa testovaná chemikália aplikuje na epidermálne povrchy kožných terčíkov až na 24 hodín v dvojkomorovom testovacom systéme, kde kožné terčíky fungujú ako oddelenie medzi komorami.

Kožné disky sa získavajú z myší zabitých človekom vo veku 28 – 30 dní. Žieravé chemikálie sú definované svojou schopnosťou spôsobiť stratu normálnej integrity stratum corneum a bariérovej funkcie. Toto sa meria ako pokles pod prahovú úroveň v teste transkutánneho elektrického odporu . Pre transkutánny elektrický odpor kože myší bola zvolená hraničná hodnota 5 kΩ na základe rozsiahlych údajov pre širokú škálu látok, pričom prevažná väčšina hodnôt je jednoznačne výrazne nad (zvyčajne až 10 kΩ) alebo výrazne pod (zvyčajne až 3 kΩ) touto hodnotou. Vo všeobecnosti testované chemikálie, ktoré nie sú žieravé, ale dráždivé alebo nedráždivé u zvierat, nespôsobia pokles transkutánneho elektrického odporu pod túto hraničnú hodnotu. Okrem toho použitie iných prípravkov na kožu alebo iného vybavenia môže zmeniť hraničnú hodnotu a vyžadovať si ďalšie overenie.

Do testovacieho postupu bol zahrnutý krok viazania farbiva na potvrdenie pozitívnych výsledkov transkutánneho elektrického odporu vrátane hodnôt okolo 5 kΩ. Krok viazania farbiva určuje, či je zvýšenie iónovej permeability spôsobené fyzikálnou deštrukciou stratum corneum. Ukázalo sa, že metóda testovania transkutánneho elektrického odporu s použitím kože myší zisťuje podráždenie in vivo u králikov hodnotených podľa normy OECD TG 404.

Pred rutinným používaním metódy testovania transkutánneho elektrického odporu na myšacej koži, ktorá je v súlade s touto normou, musia laboratóriá preukázať svoju odbornosť správnou klasifikáciou navrhovaných položiek odbornej spôsobilosti v súlade s touto normou. Ak látka zo zoznamu nie je k dispozícii alebo je opodstatnená, možno použiť inú látku, pre ktorú sú k dispozícii dostatočné referenčné údaje in vivo a in vitro.

Spomedzi mnohých testov, meraní, analýz a hodnotiacich štúdií, ktoré poskytuje pre podniky v rôznych sektoroch, naša organizácia poskytuje testovacie služby definované v norme „OECD TG 430 In vitro podráždenie pokožky: Transkutánny elektrický odporový test (TER)“ so svojimi vyškolenými a odborný personál a moderné technologické vybavenie.