استاندارد «OECD TG 442E حساسیت‌زایی پوستی آزمایشگاهی - آزمایش فعال‌سازی رده سلولی انسانی (h-CLAT)» که تحت دستورالعمل‌های OECD در مورد رفتار تجاری مسئولانه برای شرکت‌های چندملیتی (دستورالعمل‌های OECD) منتشر شده است، برای رسیدگی به فعال شدن سلول‌های دندریتیک، یک رویداد کلیدی در مسیر پیامد نامطلوب برای حساسیت‌زایی پوستی، پیشنهاد شده است.
این دستورالعمل آزمایش، به حساسیت پوستی نقطه پایانی خطر برای سلامت انسان پس از قرار گرفتن در معرض یک ماده شیمیایی آزمایشی می‌پردازد. حساسیت پوستی به یک پاسخ آلرژیک پس از تماس پوست با ماده شیمیایی آزمایشی اشاره دارد، همانطور که توسط سیستم هماهنگ جهانی طبقه‌بندی و برچسب‌گذاری مواد شیمیایی سازمان ملل متحد تعریف شده است.
این استاندارد چهار روش آزمایش آزمایشگاهی (in vitro) را ارائه می‌دهد که به رویداد کلیدی یکسانی در مسیر نتیجه منفی می‌پردازند:
همه این روش‌ها برای پشتیبانی از تمایز بین مواد حساس‌کننده پوست و غیر حساس‌کننده‌ها مطابق با سیستم هماهنگ جهانی طبقه‌بندی و برچسب‌گذاری مواد شیمیایی سازمان ملل متحد استفاده می‌شوند. روش‌های آزمایشی که در این راهنمای آزمایش شرح داده شده‌اند، تغییرات در بیان مجموعه‌ای از ژن‌های مرتبط با فرآیند فعال‌سازی مونوسیت‌ها و سلول‌های دندریتیک (نشانگر زیستی ژنومی) پس از قرار گرفتن در معرض نشانگرهای سطح سلول یا مواد حساس‌کننده را کمّی می‌کنند.
استاندارد OECD TG 442E یک آزمایش آزمایشگاهی قوی برای شناسایی مواد شیمیایی حساس کننده پوست با کاربرد گسترده و دقت پیش‌بینی بیش از 90 درصد است. این آزمایش یک پیش‌بینی دودویی ارائه می‌دهد که نمونه‌های آزمایش را به عنوان حساس کننده پوست یا غیر حساس کننده طبقه‌بندی می‌کند. هدف از این دستورالعمل تعیین این است که آیا یک ماده شیمیایی می‌تواند با فعال کردن پاسخ‌های ایمنی خاص بدون انجام آزمایش روی حیوانات، باعث حساسیت پوستی، یعنی درماتیت تماسی آلرژیک، شود یا خیر.
آزمایش فعال‌سازی رده سلولی انسان (h-CLAT) یک آزمایش آزمایشگاهی (غیر حیوانی) است که برای ارزیابی اینکه آیا یک ماده شیمیایی می‌تواند باعث حساسیت پوستی شود یا خیر، استفاده می‌شود. حساسیت پوستی یک واکنش آلرژیک است که در اثر واکنش بیش از حد سیستم ایمنی به یک ماده پس از تماس پوستی ایجاد می‌شود. h-CLAT برای مدل‌سازی یک مرحله بیولوژیکی کلیدی در ایجاد حساسیت پوستی طراحی شده است: فعال شدن سلول‌های دندریتیک (نوعی سلول ایمنی) توسط یک ماده شیمیایی حساس‌کننده.
این روش آزمایش مهم است زیرا جایگزین آزمایش‌های قدیمی‌تر مبتنی بر حیوانات می‌شود. علاوه بر این، استاندارد OECD TG 442E به این دلیل ارزشمند است که روش‌های استاندارد، علمی معتبر و پذیرفته‌شده بین‌المللی را برای ارزیابی اینکه آیا مواد شیمیایی باعث حساسیت پوستی می‌شوند یا خیر، ارائه می‌دهد. حساسیت پوستی نوعی واکنش آلرژیک است که در اثر تماس مکرر پوست با آن ایجاد می‌شود.
روش h-CLAT تغییرات در بیان نشانگرهای سطح سلولی مرتبط با فرآیند فعال‌سازی مونوسیت‌ها و سلول‌های دندریتیک را در رده سلولی لوسمی مونوسیت انسانی THP-1 پس از قرار گرفتن در معرض حساس‌کننده‌ها، کمّی‌سازی می‌کند. سپس از سطوح بیان اندازه‌گیری شده نشانگرهای سطح سلول دندریتیک برای پشتیبانی از تمایز بین حساس‌کننده‌های پوستی و غیرحساس‌کننده‌ها استفاده می‌شود.
این روش یک سنجش آزمایشگاهی است که تغییرات در بیان نشانگر سطح سلول را در سلول‌های THP-1 از رده سلولی لوسمی مونوسیت انسانی پس از 24 ساعت قرار گرفتن در معرض یک ماده شیمیایی آزمایشی اندازه‌گیری می‌کند. این مولکول‌های سطحی، نشانگرهای معمول فعال‌سازی THP-1 مونوسیت هستند و می‌توانند فعال‌سازی سلول‌های دندریتیک را که نقش مهمی در آماده‌سازی سلول‌های T دارند، تقلید کنند. تغییرات در بیان نشانگر سطحی پس از رنگ‌آمیزی سلول با آنتی‌بادی‌های نشاندار شده با فلوروکروم با استفاده از فلوسیتومتری اندازه‌گیری می‌شوند. اندازه‌گیری سمیت سلولی به طور همزمان انجام می‌شود تا ارزیابی شود که آیا افزایش بیان نشانگر سطحی در غلظت‌های زیر سیتوتوکسیک رخ می‌دهد یا خیر. شدت فلورسانس نسبی نشانگرهای سطحی در مقایسه با کنترل حلال/حامل محاسبه و در مدل پیش‌بینی برای پشتیبانی از تمایز بین حساس‌کننده‌ها و غیرحساس‌کننده‌ها استفاده می‌شود.
به طور خلاصه، OECD TG 442 برای پشتیبانی از آزمایش ایمنی اخلاقی، قابل اعتماد و جهانی سازگار مواد شیمیایی و محصولات مصرفی، به ویژه با توجه به مقررات در حال تحول و تقاضای عمومی برای علم بدون ظلم به حیوانات، ضروری است.
سازمان ما که سال‌هاست از طریق طیف گسترده‌ای از فعالیت‌های آزمایش، اندازه‌گیری، تجزیه و تحلیل و ارزیابی، از کسب‌وکارها در تمام بخش‌ها حمایت می‌کند، دارای تیمی قوی از کارکنان است که از نزدیک پیشرفت‌های جهانی در علم و فناوری را دنبال می‌کنند و دائماً در حال بهبود خود هستند. در این زمینه، ما همچنین خدمات آزمایشی را مطابق با استاندارد OECD TG 442E حساسیت پوستی آزمایشگاهی - آزمایش فعال‌سازی رده سلولی انسانی (h-CLAT) به کسب‌وکارها ارائه می‌دهیم.
برای دریافت قرار ملاقات، برای دریافت اطلاعات دقیق تر و یا درخواست ارزیابی، می توانید از ما بخواهید فرم ما را پر کند و به شما برسد.
