Norma Amerického liekopisu (USP) s názvom „USP 61 Mikrobiologické vyšetrenie nesterilných výrobkov – Testy počítania mikróbov“ opisuje štandardizované postupy kvantitatívneho stanovenia životaschopných mikroorganizmov v nesterilných farmaceutických výrobkoch a iných materiáloch, na ktoré sa táto časť môže vzťahovať. Táto norma obsahuje metódu na stanovenie počtu mezofilných baktérií a húb, ktoré môžu rásť za aeróbnych podmienok.
Účelom normy USP 61 nie je len určiť prítomnosť alebo neprítomnosť mikroorganizmov. Namiesto toho poskytuje kontrolovaný a reprodukovateľný prístup k určovaniu počtu mikróbov a hodnoteniu, či produkt spĺňa definované mikrobiologické špecifikácie kvality.
Táto norma sa vzťahuje na testovanie farmaceutických výrobkov na stanovenie ich antimikrobiálnej aktivity. Cieľom testu je preukázať, že médium použité na počítanie mikroorganizmov je vhodné.
Nesterilné farmaceutické výrobky nemusia byť úplne bez mikroorganizmov, ale ich mikrobiálne hladiny musia byť riadne kontrolované. Nadmerná mikrobiálna kontaminácia môže viesť k znehodnoteniu výrobku, ovplyvniť jeho účinnosť a potenciálne predstavovať riziká pre pacientov.
Norma USP 61 preto poskytuje štandardizovaný postup mikrobiologického počítania, ktorý možno použiť počas kontroly kvality, testovania hotových výrobkov, výrobných vyšetrovaní a hodnotenia mikrobiologickej kvality.
Táto norma je obzvlášť dôležitá, pretože mikrobiologické výsledky môžu byť výrazne ovplyvnené technikou prípravy vzorky, kultivačnými podmienkami, výťažnosťou mikroorganizmov a metódou počítania. Štandardizácia týchto faktorov zvyšuje spoľahlivosť a porovnateľnosť výsledkov testov.
Norma USP 61 primárne špecifikuje množstvo živých aeróbnych mezofilných mikroorganizmov vrátane:
Testy sú kvantitatívne, čo znamená, že výsledok je vyjadrený ako počet mikróbov, nie jednoducho ako „detekované“ alebo „nedetekované“. Preto sa norma USP 61 líši od normy USP 62. Zatiaľ čo norma USP 62 sa zaoberá detekciou špecifikovaných mikroorganizmov, norma USP 61 sa zameriava na počítanie.
Základným princípom je správne pripraviť vzorku produktu, umiestniť príslušné množstvo pripravenej vzorky do alebo na vhodné mikrobiologické médium, inkubovať za stanovených podmienok a potom spočítať vyvíjajúce sa kolónie. V závislosti od povahy produktu môžu byť vhodné rôzne techniky počítania. Medzi bežné prístupy patria:
Zvolená metóda musí byť vhodná pre daný produkt. Niektoré farmaceutické produkty môžu inhibovať mikrobiálny rast, čím sa priame počítanie stáva nespoľahlivým, pokiaľ nie je produkt správne zriedený, neutralizovaný alebo inak ošetrený.
Jedným z najdôležitejších aspektov normy USP 61 je preukázanie, že zvolený testovací postup dokáže skutočne izolovať mikroorganizmy z produktu. Produkt môže obsahovať antimikrobiálne látky, konzervačné látky, nadmerne vysoké hodnoty pH, vysoké koncentrácie solí alebo iné vlastnosti, ktoré inhibujú rast mikróbov. Ak sa tieto účinky neriešia, test môže viesť k umelo zníženému počtu mikróbov.
Záverom možno povedať, že vhodnosť metódy počítania sa hodnotí pomocou vhodných testovacích mikroorganizmov a kontrol. Cieľom je preukázať, že mikroorganizmy je možné z produktu získať späť za zvolených testovacích podmienok. Ide o kritický koncept kontroly kvality: Nízke počty mikróbov sú zmysluplné iba vtedy, ak testovacia metóda preukáže dostatočnú návratnosť.
Kultivačné médium použité v teste musí byť schopné podporovať rast mikroorganizmov, pre ktoré je test určený. Preto norma USP 61 zahŕňa test podporujúci rast ako súčasť mikrobiologickej kontroly. To pomáha preukázať, že kultivačné médium je vhodné na regeneráciu mikroorganizmov. Na testovanie média sa používajú vhodné referenčné mikroorganizmy a hodnotí sa ich rastová schopnosť za špecifikovaných podmienok. To pomáha rozlíšiť skutočne nízku mikrobiálnu populáciu od zlého výsledku, ktorý je dôsledkom nevhodného alebo chybného kultivačného média.
Dôležitou súčasťou postupu sú aj negatívne kontroly. Negatívna kontrola sa používa na preukázanie, že testovací systém, prostredie, zariadenie a procesné postupy nie sú kontaminované. Ak mikroorganizmy rastú vo vhodnej negatívnej kontrole, môže byť potrebné preskúmať platnosť testu. Norma USP 61 preto nie je len postupom počítania kolónií. Zahŕňa kontroly určené na preukázanie, že mikrobiologický výsledok je technicky zmysluplný.
Príprava vzorky závisí vo veľkej miere od fyzikálnych a chemických vlastností produktu. Medzi príklady patria:
Cieľom je získať reprezentatívnu vzorku a zároveň sa vyhnúť podmienkam, ktoré umelo zvyšujú alebo znižujú mikrobiálnu výťažnosť.
Po inkubácii sa spočítajú mikrobiálne kolónie a výsledok sa vypočíta na základe množstva testovaného produktu a príslušných podmienok riedenia alebo filtrácie. Výsledky možno vyjadriť ako počet mikróbov takto:
Výsledok sa potom porovná s mikrobiologickými kritériami prijateľnosti platnými pre daný konkrétny produkt.
Dôležitým bodom je, že samotná norma USP 61 je primárne testovacia metóda. Prijateľný mikrobiálny limit je určený príslušnou monografiou, špecifikáciou, regulačnou požiadavkou alebo inou vhodnou normou kvality, a nie je automaticky rovnaký pre každý produkt.
Norma USP 61 sa primárne vzťahuje na nesterilné farmaceutické výrobky vrátane vhodných hotových výrobkov, surovín a iných farmaceutických potrieb, na ktoré sa táto časť vzťahuje. Môže sa vzťahovať aj na iné regulované výrobky a aplikácie. Napríklad FDA uvádza túto normu ako uznávanú konsenzuálnu normu pre zdravotnícke pomôcky. Použiteľnosť by sa však mala vždy určiť v súlade s príslušnou špecifikáciou výrobku, monografiou, regulačnými požiadavkami a zamýšľaným použitím.
Norma USP 61 je nevyhnutná, pretože mikrobiálnu kontamináciu nie je vždy možné spoľahlivo posúdiť vizuálnou kontrolou alebo všeobecným laboratórnym pozorovaním. Táto norma stanovuje nasledovné:
Záverom možno povedať, že norma USP 61 je kľúčovou farmaceutickou mikrobiologickou normou na stanovenie hladiny životaschopných mikroorganizmov v životaschopných nesterilných produktoch. Jej hlavným zameraním je kvantitatívne stanovenie počtu aeróbnych mikroorganizmov. Táto norma tiež zdôrazňuje vhodnosť metódy, testy podporujúce rast, vhodné kontroly, prípravu vzoriek a spoľahlivé stanovenie počtu.
Pre výrobcov je správne uplatňovanie normy USP 61 kľúčové, pretože spoľahlivosť výsledku mikrobiálneho počtu závisí nielen od samotného počtu kolónií, ale aj od preukázania, že celá analytická metóda je schopná izolovať mikroorganizmy zo skúmaného produktu.
Naša organizácia so svojím kompetentným a skúseným tímom už mnoho rokov rozumie potrebám svojich klientov, poskytuje im pokročilé testovacie služby a pomáha im pri zavádzaní, implementácii a zlepšovaní systémov riadenia. V tomto rámci poskytujeme aj testovacie služby v súlade s normou USP 61.
Môžete nás požiadať, aby sme vyplnili náš formulár, aby sme dostali schôdzku, získali podrobnejšie informácie alebo požiadali o vyhodnotenie.
