EPI-200-SCT Hudkorrosionstest

Hudfrätning avser produktionen av irreversibla vävnadsskador på huden efter applicering av ett testmaterial, enligt definitionen av det globalt harmoniserade systemet för klassificering och märkning av kemiska ämnen och blandningar (GHS).

Potentialen för kemikalieinducerad hudfrätning är en viktig faktor vid upprättandet av procedurer för säker hantering, förpackning och transport av kemikalier. Olika system för klassificering av korrosiv potential ingår i internationella myndighetskrav.

EPI-200-SCT-testmetoden för hudkorrosion är baserad på erfarenheten av att frätande kemikalier är cytotoxiska efter kortvarig exponering för stratum corneum i epidermis om cytotoxicitet observeras omedelbart efter kemikalieexponering. Den är utformad för att förutsäga och klassificera hudens frätande potential hos en kemikalie med hjälp av en tredimensionell modell av mänsklig epidermis.

Den beskrivna testmetoden kan på ett tillförlitligt sätt skilja kemikalier som är frätande för huden från icke-frätande kemikalier och kan därför användas för att klassificera hudkorrosionsrisk enligt GHS-systemet som antagits av OECD. Detta test tillåter att frätande ämnen och blandningar underkategoriseras i enlighet med GHS. Denna testmetod skiljer inte mellan underkategorier och är inte utformad för att förutsäga hudirritationspotential.

Vid testning konditioneras hudvävnader genom förinkubation (1 timme eller över natten) för att frigöra transportstressrelaterade föreningar och rester. Efter förinkubation överförs vävnader till färskt underhållsmedium och exponeras topiskt med testkemikalier under 3 minuter respektive 1 timme. Två (alternativt tre) vävnader används för varje körning: negativ kontroll och positiv kontroll. Efter exponering sköljs och färgas vävnaderna och testmediet ersätts med MTT-medium. Efter 3 timmars inkubation tvättas vävnaderna med fosfatbuffrad saltlösning, färgas och det blå formazansaltet avlägsnas. Formazanextraktets optiska densitet bestäms spektrofotometriskt vid 540-570 nm och cellviabilitet beräknas för varje vävnad som en procentandel av genomsnittet av negativa kontrollvävnader. Den dermala frätande potentialen hos testmaterial klassificeras enligt den återstående cellviabiliteten som erhålls efter 3 minuter eller 1 timmes exponering för testkemikalien.

En begränsning av denna testmetod är testämnets möjliga interferens med effektmåttet MTT. En testsubstans kan direkt reducera MTT och därmed efterlikna dehydrogenasaktiviteten hos cellulära mitokondrier. Denna egenskap hos testämnet är bara ett problem om tillräckliga mängder av testämnet fortfarande finns i eller i vävnaderna vid tidpunkten för MTT-testet (efter kemisk tvättning). I detta fall kan metabolisk MTT-reduktion och direkt MTT-reduktion särskiljas och kvantifieras genom ett förfarande som beskrivs i denna standard.

Metoden är inte utformad för att vara kompatibel med mycket flyktiga testämnen. Eventuell toxisk interaktion mellan plattbrunnar kan dock undvikas genom att täcka brunnarna med ett vidhäftande täckskikt eller testa flyktiga kemikalier i separata plattor.

Hudfrätning avser förstörelse av hudvävnad i full tjocklek, vanligtvis kemiskt inducerad. I vissa andra fall kan hudnötning också hänvisa till irreversibla förändringar i hudens struktur orsakade av en kemikalie. Detta står i kontrast till hudirritation, där skadan i allmänhet är reversibel. En kemikalies potential att orsaka hudfrätning är en viktig del av upprättandet av rutiner för säker hantering och förpackning och transport av kemikalier.

Grunden för hudkorrosionstestning (SCT) är bestämning av cytotoxicitet efter exponering för en kemikalie. Denna metod är en tredimensionell modell av mänsklig hud bestående av en rekonstruerad epidermis och ett funktionellt stratum corneum (detta är det yttre lagret av hudceller som främst fungerar som en barriär). Dessutom är epidermisskiktet också uppdelat i en serie basala, ryggrads- och granulära skikt.

Testmetoden består i att topiskt exponera modellen för en kemikalie under olika tidsperioder och sedan bestämma cellviabiliteten.

Minskningen av livsduglighet i behandlade celler uttrycks i jämförelse med negativa kontroller, dvs vattenbehandlade celler). En positiv kontroll ingår också i metoden. Procentuell livskraft används för att förutsäga och klassificera hudkorrosionspotential enligt en definierad prediktionsmodell. Metoden kan användas med fasta, flytande, halvfasta och vattenlösliga och olösliga ämnen. Det är inte möjligt att utvärdera effekterna av gaser eller aerosoler med denna metod.

Bland de många test-, mätnings-, analys- och utvärderingsstudier som den tillhandahåller för företag inom olika sektorer, tillhandahåller vår organisation även testtjänster definierade i "EPI-200-SCT Skin Corrosion Test"-standarden, med utbildad och expert personal och avancerad teknisk utrustning .