Bacterial Endotoxins Assay (BET) er et in vitro-assay til påvisning og kvantificering af bakterielle endotoksiner, en komponent i cellevæggen i gram-negative bakterier. BET udføres som en del af batchfrigivelsestest for medicinsk udstyr, der har direkte eller indirekte kontakt med det kardiovaskulære system, lymfesystemet eller cerebrospinalvæsken. Injicerbare farmaceutiske produkter bør også testes for bakterielle endotoksiner. Rutinemæssig overvågning af vandsystemer og indgående materialer kan sikre, at processen ikke bidrager med endotoksiner til slutproduktet.
Denne analyse er også kendt som Limulus Amebocyte Lysate (LAL)-testen og kaldes nogle gange pyrogentesten (fordi bakterielle endotoksiner kan forårsage feber hos pattedyr, herunder mennesker). BET bør dog ikke forveksles med kaninpyrogentesten beskrevet i USP afsnit <151>.
Alle test opfylder kravene i USP sektion <85>, USP sektion <161>, ANSI / AAMI ST72: 2011, EP 2.6.14, JP 4.01 og FDA-retningslinjer for industripyrogen- og endotoksintestning: Spørgsmål og svar.
EUROLABer branchens førende inden for bakteriel endotoksintestning. For rutinetest er resultaterne typisk tilgængelige inden for fire hverdage efter prøveindsamling. Vores valideringer og metodeudvikling udføres i detaljer gennem en proces, der har vist sig at være effektiv og compliant. Med over 25 års erfaring løser vi gerne dine spørgsmål vedrørende testkriterier og kan også bistå med fejlundersøgelser og evaluering af produktionsprocessen.
Testning af bakterielle endotoksiner kan udføres ved kinetiske turbidimetriske, kinetiske kromogene eller gelkoageltestmetoder. Kinetiske testmetoder har imidlertid betydelige fordele i forhold til gelkoageltestning.
Prøveekstraktioner: Instrumentekstraktioner udføres med vand fri for detekterbare endotoksiner. Ekstraktionsprocessen involverer skylning og/eller skylning af instrumenterne med en minimal mængde væske for at sikre korrekt fjernelse. Instrumenter med en ikke-pyrogen væskevej fjernes ved at skylle den relevante væskevej med ekstraktionsvæske opvarmet til 37 ± 1 °C og fjerne kontakt i mindst en time. Instrumentnedsænkning udføres ved at skylle instrumenterne i ekstraktionsvæske ved 37-40 °C i mere end 60 minutter med intermitterende vortexing i en orbitalryster.
Testprocedure: En BET involverer analyse af en flydende prøve eller et prøveekstrakt ved hjælp af Limulus Amebocyte Lysate (LAL). LAL er et reagens fremstillet af blodet fra hesteskokrabben. I nærvær af bakterielle endotoksiner reagerer lysatet og danner en koagel eller, afhængigt af teknikken, forårsager det en farveændring. Testprøven sammenlignes med en standardkurve lavet ud fra kendte endotoksinkoncentrationer. Alle tests udføres mindst to gange. En positiv produktkontrol og en negativ kontrol er inkluderet som en del af hver test.
Validering: Det er nødvendigt at demonstrere, at testprøven ikke forstyrrer evnen til at detektere endotoksiner. Dette opnås ved positiv produktkontrol (også kendt som spike recovery) for kinetiske testmetoder og et separat hæmnings- og forstærkningsforsøg for gelkoagulationsmetoden.
Prøver, der kræver en behandling såsom rekonstituering, varmedenaturering, centrifugering eller filtrering i et andet opløsningsmiddel end vand, skal valideres for at vise, at behandlingen ikke resulterede i tab af endotoksin. Dette opnås ved at inokulere prøven med endotoksiner og udsætte den podede prøve for den valgte behandling.
Endotoksingrænsen for medicinsk udstyr er ikke mere end 20.0 EU / enhed, hvis enheden ikke kommer i kontakt med cerebrospinalvæsken, i hvilket tilfælde grænsen er 2.15 EU / enhed. Oftalmiske implantater og OVD'er skal muligvis opfylde en nedre grænse på 0.2 AB/enhed eller 0.2 AB/mL. Endotoksingrænser for farmaceutiske produkter er baseret på den maksimale dosis, der kan administreres i en 1-times periode.
EUROLAB, med sit yderst eksperthold og internationalt akkrediterede laboratorier, Bakteriel endotoksinetest Den udfører alle test-, analyse-, måle-, evaluerings- og rapportgenereringstjenester fuldstændigt og pålideligt.
Du kan bede os om at udfylde vores formular for at få en aftale, for at få mere detaljerede oplysninger eller for at anmode om en evaluering.
