ASTM E729 Balıklar, Makro Omurgasızlar ve Amfibiler Üzerinde Test Malzemelerinin Akut Toksisite Testleri

Amerikan Test ve Malzeme Kuruluşu (ASTM) tarafından geliştirilen, “ASTM E729 Balıklar, makro omurgasızlar ve amfibiler üzerinde test malzemelerinin akut toksisite testlerinin yürütülmesine ilişkin standart kılavuz“ standardında, seyreltme suyuna eklenen ancak gıdaya eklenmeyen bir test maddesinin, belirli tatlı su ve tuzlu su balıkları, makro omurgasızlar ve amfibiler üzerindeki olumsuz etkilerine (örneğin ölümcüllük ve hareketsizlik) ilişkin laboratuvar verilerinin elde edilmesine yönelik prosedürler açıklanmaktadır. Bu veriler genellikle türe bağlı olarak 2 ila 4 günlük maruz kalma süreleri boyunca elde edilir. Bu prosedürler, muhtemelen diğer birçok sucul türle akut toksisite testleri yapmak için yararlıdır, ancak değişiklikler gerekebilir.

Akut toksisite testi, belirli deneysel koşullar altında bir test maddesine kısa süreli maruz kalmanın test organizmaları üzerindeki ani etkileri hakkında bilgi edinmek için yapılır. Akut toksisite testi, gecikmiş etkilerin olup olmayacağı hakkında bilgi vermez, ancak gerekirse uygun besleme ile maruziyet sonrası bir gözlem dönemi bu tür bilgileri sağlayabilir. Test maddesinin biyoyararlanımı, bölgeye özgü su kalitesi koşulları nedeniyle gerçek dünya maruziyetleri ile laboratuvar maruziyetleri arasında da farklılık gösterebilir.

Akut toksisite testlerinin sonuçları, hareketli organizmaların mümkün olduğunca maruz kalmaktan kaçınabileceği ve bentik organizmalara yönelik toksisitenin test materyalinin substrata adsorpsiyonuna veya çökelmesine bağlı olabileceği göz önünde bulundurularak, saha koşullarında benzer koşullar altında su organizmalarında meydana gelmesi muhtemel akut etkileri tahmin etmek için kullanılabilir.

Akut test sonuçları,

• Farklı türlerin akut duyarlılıklarını ve farklı test maddelerinin akut toksisitelerini karşılaştırmak ve çeşitli çevresel faktörlerin bu test sonuçları üzerindeki etkilerini incelemek için kullanılabilir.
• Sucul organizmalar için maddelerin tehlikelerini değerlendirirken veya sucul organizmalar için su kalitesi kriterlerini türetirken önemli bir husus olabilir.
• Test maddelerinin biyolojik kullanılabilirliğini ve aralarındaki yapı-aktivite ilişkilerini incelemek için yararlı olabilir.
• Sıcaklığa, seyreltme suyunun bileşimine, test organizmalarının durumuna, maruz kalma tekniğine ve diğer faktörlere bağlıdır.

ASTM E729 standardı, laboratuvar ortamında akut toksisite testlerinin yapılması için ayrıntılı prosedürler sağlar. Bu testler, bir maddenin seçilen tatlı su su organizmaları üzerindeki kısa vadeli olumsuz etkilerini, madde ortamlarına (tipik olarak seyreltme suyuna) verildiğinde değerlendirir. Birincil sonuç genellikle ölümcüllüktür, ancak hayatta kalan organizmalarda hareketsizlik veya anormal davranış gibi diğer etkiler de kaydedilebilir.

Akut testler tipik olarak 96 saat (4 gün) sürer, ancak organizmaya ve test tasarımına bağlı olarak daha kısa veya biraz daha uzun süreler de mümkündür.

Bu standart, üç ana test organizma grubuna odaklanmaktadır:

• Balıklar (örneğin yağlıbaş küçük balık, gökkuşağı alabalığı, mavi yüzgeçli güneş balığı veya diğer hassas tatlı su türleri)
• Makro omurgasızlar (örneğin daphnia magna)
• Amfibiler (örneğin bazı kurbağa türlerinin iribaşları)

Deniz ve nehir ağzı organizmaları, sediment toksisitesi veya kronik / uzun süreli maruz kalma çalışmaları için tasarlanmamıştır. Bunlar diğer ASTM standartlarında kapsanmaktadır.

Bu standart, test materyalinin özelliklerine, çözünürlüğüne, uçuculuğuna ve laboratuvar olanaklarına bağlı olarak esneklik sağlayan üç temel maruz kalma sistemini tanımlar:

• Statik: Test organizmaları, test odasında test materyalinin tek, değişmeyen bir konsantrasyonuna maruz bırakılır. Basit ve uygun maliyetli, ancak su kalitesi zamanla bozulabilir.
• Yenileme (yarı statik): Test çözeltisi düzenli aralıklarla (örneğin her 24 veya 48 saatte bir) tamamen veya kısmen değiştirilir. Daha istikrarlı koşulların korunmasına yardımcı olur.
• Akışlı: Taze test çözeltisi sürekli olarak test odalarına verilir, bu da en tutarlı maruz kalmayı ve en iyi su kalitesini sağlar. Bu yöntem uçucu, bozunabilir veya yüksek oranda emici maddeler için tercih edilir.

Testlerde genel olarak şu adımlar izlenir:

• Sağlıklı test organizmalarının seçimi ve adaptasyonu.
• Seyreltme suyunun hazırlanması (genellikle tanımlanmış sertlik, pH değeri ile yeniden oluşturulmuş tatlı su).
• Test çözeltilerinin hazırlanması (malzemenin suda çözünürlüğü düşükse genellikle bir çözücü kullanılır).
• Uygun konsantrasyon aralığını belirlemek için aralık belirleme testleri.
• Birden fazla konsantrasyon + kontrol ile kesin testler.
• Su kalitesi parametrelerinin izlenmesi (çözünmüş oksijen, sıcaklık, pH değeri, iletkenlik).
• Düzenli aralıklarla (genellikle 24, 48, 72, 96 saat) ölüm veya hareketsizliğin kaydedilmesi.
• En sık olarak uç noktaların hesaplanması:
• LC50 (orta ölümcül konsantrasyon, test popülasyonunun yüzde 50’sini öldürdüğü tahmin edilen konsantrasyon)
• EC50 (hareketsizlik gibi ölümcül olmayan etkiler için orta etkili konsantrasyon)
• NOEC / LOEC (gözlemlenmeyen etki ve en düşük gözlemlenen etki konsantrasyonları)

ASTM E729 standardı, yıllardır çevre toksikolojisinde temel bir referans olmuştur. Şunlar tarafından sıklıkla referans alınır veya istenir:

• Düzenleyici kurumlar (örneğin ABD Çevre Koruma Ajansı (EPA) pestisit kaydı, atık su deşarj izinleri, kimyasal tehlike değerlendirmeleri için).
• Ürün güvenliği değerlendirmeleri (endüstriyel kimyasallar, ilaçlar, tarım ürünleri).
• Çevresel etki çalışmaları.
• Yeni ortaya çıkan kirleticiler üzerine araştırmalar.

Birçok modern sucul toksisite test protokolü (balıklar için OECD 203, daphnia için OECD 202), belirli ayrıntılarda farklılık gösterse de ASTM E729 standardı ile kavramsal benzerlikler paylaşmaktadır. Bu standart, tatlı su sistemlerinde güvenilir ve tekrarlanabilir akut su toksisitesi testleri yürütmek için en çok alıntı yapılan ve saygı duyulan referanslardan biri olmaya devam etmektedir.

Kısaca ASTM E729 standardı, tatlı su sistemlerinde akut su toksisitesi testlerinin yürütülmesi için standartlaştırılmış, güvenilir ve yaygın olarak kabul görmüş bir çerçeve sağladığı için önemlidir. Bu, toksisite verilerinin dünya çapındaki laboratuvarlar, çalışmalar ve düzenleyici başvurular arasında tutarlı, tekrarlanabilir ve karşılaştırılabilir olmasını sağlamaya yardımcı olur.

Kuruluşumuz, yıllardır yetkin ve deneyimli bir kadro ile müşterilerinin ihtiyaçlarını anlamakta, ihtiyaç duydukları ileri test hizmetlerini vermekte ve yönetim sistemlerinin kurulması, uygulanması ve iyileştirilmesi konusunda yardımcı olmaktadır. Bu çerçevede işletmelere ASTM E729 standardına uygun test hizmetleri de verilmektedir.