AOAC 993.06 Enzim İmmünoassay İle Stafilokok Enterotoksinleri

Resmi Analitik Kimyagerler Derneği (AOAC) tarafından geliştirilen AOAC 993.06 standardında, gıda numunelerinde toksinlerin tanımlanması için yüksek afiniteli yakalama antikorlarının bir karışımını kullanan bir enzim immün testi tanımlanmaktadır. Bu test yönteminde numuneler, Tris tamponunda seyreltme, santrifüjleme ve süpernatantın bir şırıngadan süzülmesi ile, nihai pH 7.0 ila 8.0 değerine ayarlanarak hazırlanır. Numuneler, yaban turpu peroksidazına konjüge edilmiş antikorların karışımı ile 96 oyuklu plakalarda inkübe edilir ve bir peroksidaz substratı ile görselleştirilir. Test sonuçları görsel olarak veya bir mikrotitre plaka okuyucusu kullanılarak belirlenmektedir. Soğurma gücü yeteneği 0.200’den büyükse test stafilokokal enterotoksinler için pozitif, 0.200’e eşit ise negatif olarak kabul edilmektedir. Bu test yönteminde spesifik toksin serotipleri ayırt edilmemektedir. Bu yöntem, 4 ila 10 ng/mL stafilokokal enterotoksin içeren gıdalardan hazırlanan ekstraktlarda 1,3 ila 3,3 ng/mL stafilokokal enterotoksini tespit etmektedir.

Bu test yöntemi, aerosol numunelerinde Tip B stafilokok enterotoksinlerinin ve aerosol, katı, partikül, sıvı ve su numunelerinde Tip A ve C’nin varsayımsal analizi için geçerlidir. Ancak çevresel numune türleri için prosedürleri geliştirmek ve standart hale getirmek için daha fazla araştırmaya ihtiyaç duyulmaktadır.

Staphylococcus aureus, çok çeşitli toksinler üreten ve böylece çeşitli hastalık semptomlarına neden olan önemli bir insan patojenidir. Isıya dayanıklı enterotoksinlerin dokuz ana serolojik türünden oluşan bir aile olan stafilokokal enterotoksinler, kontamine gıda tüketiminden kaynaklanan gastroenteritin önde gelen nedenidir. Ayrıca stafilokokal enterotoksinler, spesifik olmayan T hücresi proliferasyonunu uyaran güçlü süperantijenlerdir. Bunlar, benzer yapılar ve faaliyetlerle yakın filogenetik ilişkileri paylaşır.

Stafilokokal enterotoksinler, genel olarak farklı gıdaların, özellikle işlenmiş et ve süt ürünlerinin yenmesinden sonra ortaya çıkan, yanlış kullanım ve ardından yüksek sıcaklıklarda depolama yoluyla stafilokoka aureus ile kontamine olan gıda zehirlenmesinin önemli bir nedenidir. Semptomlar hızlı başlar ve ishalli veya ishalsiz mide bulantısı ve şiddetli kusmayı içerir.

Kuruluşumuz, çeşitli sektörlerdeki işletmeler için verdiği sayısız test, ölçüm, analiz ve değerlendirme çalışmaları arasında, eğitimli ve uzman bir kadro ve gelişmiş teknolojik donanımı ile, AOAC 993.06 standardı kapsamında, enzim immünoassay ile stafilokok enterotoksinleri test hizmetleri de vermektedir.