Análises de cromatografia de exclusão de tamanho (SEC)

A cromatografia de exclusão por tamanho ou cromatografia de separação por tamanho (SEC) é uma técnica de separação baseada no tamanho molecular dos componentes. A separação é alcançada por exclusão diferencial de moléculas de amostra dos poros do material de embalagem à medida que passam por um leito de partículas porosas. A principal característica deste ensaio é sua interação suave e não absorvente com a amostra, o que garante um alto nível de atividade biomolecular.

A cromatografia de separação por tamanho é um método de separação cromatográfica amplamente utilizado para a caracterização de polímeros sintéticos. Neste método, a acessibilidade dos poros dependente do tamanho das moléculas de polímero é usada e as moléculas de polímero são separadas de acordo com seus tamanhos de cadeia. O tamanho da cadeia do polímero depende não apenas do peso molecular, mas também de outras propriedades moleculares, como composição, arquitetura da cadeia e microestrutura. Portanto, este método de análise não pode, por exemplo, separar homopolímeros não lineares por peso molecular ou copolímeros por composição.

A cromatografia de exclusão por tamanho separa as moléculas por tamanho por filtração através de um gel. O gel consiste em grânulos esféricos contendo poros com uma certa distribuição de tamanho. A separação ocorre quando moléculas de diferentes tamanhos são introduzidas ou removidas dos poros da matriz.

A norma utilizada nessas análises é a ISO 16014, desenvolvida pela Organização Internacional de Normalização. Essa norma, sob o título principal "Plásticos - Determinação da massa molecular média e da distribuição de massa molecular de polímeros por cromatografia de exclusão por tamanho", consiste nas seguintes seções:

• ISO 16014-1 Parte 1: Princípios gerais
• ISO 16014-2 Parte 2: Método de calibração universal
• ISO 16014-3 Parte 3: Método de baixa temperatura
• ISO 16014-4 Parte 4: Método de alta temperatura
• ISO 16014-5 Parte 5: Método de dispersão de luz

Este padrão descreve um método geral para determinar o peso molecular médio e a distribuição do peso molecular de polímeros usando cromatografia de exclusão por tamanho (SEC). O peso molecular médio e a distribuição do peso molecular podem ser obtidos a partir de uma curva de calibração construída usando padrões de polímero se estiver usando um dos métodos descritos nas seções dois, três e quatro, ou de uma curva de calibração gerada usando dados de peso molecular absoluto se cromatografia de exclusão de tamanho combinada com a detecção de dispersão de luz é usada conforme descrito na seção cinco.

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