La cromatografía de exclusión por tamaño o cromatografía de separación por tamaño (SEC) es una técnica de separación basada en el tamaño molecular de los componentes. La separación se logra mediante la exclusión diferencial de las moléculas de muestra de los poros del material de empaque a medida que pasan a través de un lecho de partículas porosas. La característica clave de este ensayo es su interacción suave y no absorbente con la muestra, lo que garantiza un alto nivel de actividad biomolecular.
-analizleri.jpg "Análisis de cromatografía de exclusión por tamaño (SEC)")
La cromatografía de separación por tamaño es un método de separación cromatográfica ampliamente utilizado para la caracterización de polímeros sintéticos. En este método, se utiliza la accesibilidad de los poros dependiente del tamaño de las moléculas de polímero y las moléculas de polímero se separan de acuerdo con los tamaños de sus cadenas. El tamaño de la cadena del polímero depende no solo del peso molecular, sino también de otras propiedades moleculares, como la composición, la arquitectura de la cadena y la microestructura. Por lo tanto, este método de análisis no puede, por ejemplo, separar homopolímeros no lineales por peso molecular o copolímeros por composición.
La cromatografía de exclusión por tamaño separa las moléculas por tamaño mediante filtración a través de un gel. El gel consta de perlas esféricas que contienen poros con una determinada distribución de tamaño. La separación ocurre cuando se introducen o eliminan moléculas de diferentes tamaños de los poros de la matriz.
La norma utilizada en estos análisis es la norma ISO 16014 desarrollada por la Organización Internacional de Normalización. Esta norma, bajo el epígrafe principal "Plásticos - Determinación del peso molecular medio y la distribución del peso molecular de polímeros mediante cromatografía de exclusión por tamaño", consta de las siguientes secciones:
Esta norma describe un método general para determinar el peso molecular promedio y la distribución del peso molecular de los polímeros mediante cromatografía de exclusión por tamaño (SEC). El peso molecular promedio y la distribución del peso molecular se pueden obtener a partir de una curva de calibración construida usando estándares de polímeros si se usa uno de los métodos descritos en las secciones dos, tres y cuatro, o de una curva de calibración generada usando datos de peso molecular absoluto si se combina la cromatografía de exclusión por tamaño con se utiliza la detección de dispersión de luz como se describe en la sección cinco.
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