La norma «OECD 302C Biodegradabilidad natural: Prueba MITI modificada (II)», publicada en el marco de las directrices de la OCDE sobre conducta empresarial responsable para empresas multinacionales (directrices de la OCDE) , describe la prueba MITI modificada (II). Esta prueba tiene como objetivo medir la demanda bioquímica de oxígeno (DBO) y analizar los residuos químicos para evaluar la biodegradabilidad natural de aquellos productos químicos que, según el método MITI estándar (I), presentan una baja biodegradabilidad.
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En estas pruebas se utiliza un dispositivo de medición del consumo de oxígeno de sistema automático cerrado (medidor de DBO). Las sustancias químicas que se van a analizar se inoculan con microorganismos en recipientes de prueba (seis viales que contienen cantidades variables de la sustancia problema). Para controlar la actividad de la vacuna conviene utilizar sustancias de control como anilina, acetato de sodio o benzoato de sodio. La demanda bioquímica de oxígeno (DBO) se mide continuamente durante todo el período de prueba.
La biodegradabilidad se calcula en base a la DBO y análisis químicos complementarios, como la medición de la concentración de carbono orgánico disuelto, concentración de químicos residuales, etc. La curva DBO se obtiene de forma continua y automática durante 14 a 28 días. Después de 14 a 28 días de prueba, se analizan el valor del pH, los productos químicos residuales y los intermedios en los recipientes de prueba.
La biodegradabilidad inherente se define como una biodegradabilidad superior al 301 por ciento pero inferior al 20 por ciento, medida según los estándares de prueba 60A-F de la OCDE.
La OCDE define cuatro clasificaciones generales de biodegradabilidad:
La biodegradabilidad natural se mide por el consumo de oxígeno. Es la única prueba estándar de la OCDE que mide la biodegradación a través de la mineralización y permite realizar pruebas de sustancias químicas insolubles. La prueba combinada de Zahn-Wellens es una alternativa que mide además el dióxido de carbono y lo utiliza como criterio de valoración de la mineralización.
Al realizar la prueba, la muestra se coloca en un recipiente sellado como fuente de carbono y se incuba por un período de 14 a 28 días. El dióxido de carbono resultante es absorbido por hidróxido de sodio. El cambio de presión en el recipiente indica consumo de oxígeno. La biodegradación es el resultado de la tasa de absorción de oxígeno por la sustancia problema y la demanda teórica de oxígeno. El dietilenglicol, una sustancia naturalmente biodegradable, se dosifica en recipientes de referencia paralelos. Al final de la prueba, se mide el carbono orgánico disuelto restante en las botellas. Opcionalmente, se pueden realizar análisis específicos de la sustancia de prueba o de los productos de transformación.
Un nivel de degradación de más del 28 por ciento de la demanda teórica de oxígeno en 70 días se considera evidencia de biodegradabilidad natural definitiva. La prueba MITI (II) es adecuada para evaluar la degradabilidad natural de sustancias solubles en agua, semivolátiles y ligeramente solubles.
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