Bacterial Endotoxins Test (BET) är en in vitro-analys för detektion och kvantifiering av bakteriella endotoxiner, en komponent i cellväggen hos gramnegativa bakterier. BET utförs som en del av batch release-testet för medicintekniska produkter som har direkt eller indirekt kontakt med det kardiovaskulära systemet, lymfsystemet eller cerebrospinalvätskan. Injicerbara farmaceutiska produkter bör också testas med avseende på bakteriella endotoxiner. Rutinmässig övervakning av vattensystem och inkommande material kan säkerställa att processen inte tillför endotoxiner till slutprodukten.
Detta experiment är också känt som Limulus Amebocyte Lysate (LAL) test och kallas ibland pyrogentestet (eftersom bakteriella endotoxiner kan orsaka feber hos däggdjur, inklusive människor). BET ska emellertid inte förväxlas med kaninpyrogentestet som beskrivs i USP-avsnitt <151>.
Alla tester uppfyller kraven i USP avsnitt <85>, USP avsnitt <161>, ANSI / AAMI ST72: 2011, EP 2.6.14, JP 4.01 och FDA Guide for Industry Pyrogen and Endotoxin Test: Questions and Answers.
EUROLABär branschledande inom bakteriell endotoxintestning. För rutintestning är resultaten vanligtvis tillgängliga inom fyra arbetsdagar efter provtagningen. Våra valideringar och metodutveckling görs i detalj genom en process som har visat sig vara effektiv och följsam. Med över 25 års erfarenhet löser vi gärna dina frågor gällande testkriterier och kan även bistå vid felutredningar och utvärdering av produktionsprocessen.
Bakteriellt endotoxintest kan göras med kinetiska turbidimetriska, kinetiska kromogena eller gelproppar. Kinetiska testmetoder har dock betydande fördelar jämfört med gelproppstest.
Provextraktioner: Instrumentextraktioner utförs med vatten fritt från detekterbara endotoxiner. Extraktionsprocessen innebär att instrumenten spolas och/eller sköljs med en minimal mängd vätska för att säkerställa korrekt avlägsnande. Instrument med en icke-pyrogen vätskeväg avlägsnas genom att den relevanta vätskevägen spolas med extraktionsvätska uppvärmd till 37 ± 1 °C och kontakten avlägsnas i minst en timme. Instrumentnedsänkning utförs genom att instrumenten spolas i extraktionsvätska vid 37–40 °C i mer än 60 minuter med intermittent vortexning i en orbitalskakare.
Testprocedur: Ett BET-test innebär att man analyserar ett flytande prov eller provextrakt med hjälp av Limulus Amebocyte Lysate (LAL). LAL är ett reagens som framställs från blodet från hästskokrabban. I närvaro av bakteriella endotoxiner reagerar lysatet och bildar en koagel eller, beroende på teknik, orsakar en färgförändring. Testprovet jämförs med en standardkurva gjord från kända endotoxinkoncentrationer. Alla tester utförs minst två gånger. En positiv produktkontroll och en negativ kontroll ingår som en del av varje test.
Validering: Det är nödvändigt att visa att testprovet inte stör förmågan att detektera endotoxiner. Detta åstadkoms genom positiv produktkontroll (även känd som spike-återvinning) för kinetiska testmetoder och ett separat hämnings- och förstärkningsexperiment för gelkoagulationsmetoden.
Prover som kräver en process såsom rekonstituering, värmedenaturering, centrifugering eller filtrering i ett annat lösningsmedel än vatten bör valideras för att visa att behandlingen inte resulterar i endotoxinförlust. Detta åstadkoms genom att inokulera provet med endotoxiner och utsätta det vaccinerade provet för den valda behandlingen.
Endotoxingränsen för medicintekniska produkter är inte mer än 20.0 AU / enhet om enheten inte är i kontakt med cerebrospinalvätska, i vilket fall gränsen är 2.15 AU / enhet. Oftalmiska implantat och OVD kan behöva uppfylla en nedre gräns på 0.2 AB / enhet eller 0.2 AB / mL. Endotoxingränser för farmaceutiska produkter baseras på den maximala dosen som kan administreras under en timmes period.
EUROLAB, med sitt mycket expertteam och internationellt ackrediterade laboratorier, Bakteriellt endotoxintest utför alla test-, analys-, mät-, utvärderings- och rapportgenereringstjänster på ett komplett och pålitligt sätt.
Du kan be oss fylla i vårt formulär för att få en tid, för att få mer detaljerad information eller för att begära en utvärdering.
