Bakteriálny endotoxínový test (BET) je test in vitro na detekciu a kvantifikáciu bakteriálnych endotoxínov, zložky bunkovej steny gramnegatívnych baktérií. BET sa vykonáva ako súčasť testu uvoľňovania šarže pre zdravotnícke pomôcky, ktoré majú priamy alebo nepriamy kontakt s kardiovaskulárnym systémom, lymfatickým systémom alebo mozgovomiechovým mokom. Injekčné farmaceutické výrobky by sa mali testovať aj na bakteriálne endotoxíny. Rutinné monitorovanie vodných systémov a prichádzajúcich materiálov môže zabezpečiť, že proces nepridáva endotoxíny do konečného produktu.
Tento experiment je tiež známy ako test Limulus Amebocyte Lysate (LAL) a niekedy sa nazýva aj pyrogénový test (pretože bakteriálne endotoxíny môžu spôsobiť horúčku u cicavcov vrátane ľudí). BET by sa však nemal zamieňať s pyrogénovým testom na králikoch opísaným v časti USP <151>.
Všetky testy spĺňajú požiadavky uvedené v oddieloch USP <85>, USP oddiel <161>, ANSI / AAMI ST72: 2011, EP 2.6.14, JP 4.01 a FDA Guide for Industry Pyrogen and Endotoxin Test: Questions and Answers.
EUROLABje lídrom v oblasti testovania bakteriálnych endotoxínov. Pri rutinnom testovaní sú výsledky zvyčajne dostupné do štyroch pracovných dní po odbere vzorky. Naše validácie a vývoj metód sa vykonáva do detailov prostredníctvom procesu, ktorý sa ukázal ako efektívny a vyhovujúci. S viac ako 25-ročnými skúsenosťami radi vyriešime vaše otázky týkajúce sa testovacích kritérií a môžeme tiež pomôcť pri vyšetrovaní chýb a hodnotení výrobného procesu.
Test na bakteriálne endotoxíny sa môže uskutočniť kinetickými turbidimetrickými, kinetickými chromogénnymi alebo gélovými testami. Kinetické testovacie metódy však majú oproti testovaniu gélovou zrazeninou významné výhody.
Extrakcie vzoriek: Extrakcie nástrojov sa vykonávajú s použitím vody bez detekovateľných endotoxínov. Proces extrakcie zahŕňa prepláchnutie a/alebo oplachovanie nástrojov minimálnym množstvom kvapaliny, aby sa zabezpečilo ich správne odstránenie. Nástroje s nepyrogénnou dráhou tekutiny sa odstránia prepláchnutím príslušnej dráhy tekutiny extrakčnou tekutinou zahriatou na 37 ± 1 °C a odstránením kontaktu na najmenej jednu hodinu. Ponorenie nástrojov sa vykonáva prepláchnutím nástrojov v extrakčnej tekutine pri teplote 37 – 40 °C na viac ako 60 minút s prerušovaným vírením v orbitálnej trepačke.
Postup testu: BET zahŕňa analýzu kvapalnej vzorky alebo extraktu vzorky pomocou lyzátu amebocytov Limulus (LAL). LAL je činidlo vyrobené z krvi ostrorepa. V prítomnosti bakteriálnych endotoxínov lyzát reaguje za vzniku zrazeniny alebo v závislosti od techniky spôsobuje zmenu farby. Testovaná vzorka sa porovnáva so štandardnou krivkou vytvorenou zo známych koncentrácií endotoxínov. Všetky testy sa vykonávajú aspoň dvakrát. Súčasťou každého testu je pozitívna kontrola produktu a negatívna kontrola.
Validácia: Je potrebné preukázať, že testovaná vzorka neovplyvňuje schopnosť detekcie endotoxínov. Toto sa dosiahne pozitívnou kontrolou produktu (známou aj ako regenerácia hrotu) pre kinetické testovacie metódy a samostatným experimentom s inhibíciou a zosilnením pre metódu gélového zrážania.
Vzorky vyžadujúce postup, ako je rekonštitúcia, denaturácia teplom, odstredenie alebo filtrácia v inom rozpúšťadle ako vode, by sa mali overiť, aby sa preukázalo, že ošetrenie nemá za následok stratu endotoxínu. To sa dosiahne naočkovaním vzorky endotoxínmi a podrobením očkovanej vzorky vybranej liečbe.
Limit endotoxínov pre zdravotnícke pomôcky nie je vyšší ako 20.0 AU / prístroj, ak prístroj nie je v kontakte s mozgovomiechovým mokom. V takom prípade je limit 2.15 AU / prístroj. Možno bude potrebné, aby očné implantáty a OVD splnili dolnú hranicu 0.2 AB / zariadenie alebo 0.2 AB / ml. Limity endotoxínu pre farmaceutické výrobky sú založené na maximálnej dávke, ktorú je možné podať počas 1 hodiny.
EUROLABso svojím vysoko odborným tímom a medzinárodne akreditovanými laboratóriami, Test bakteriálneho endotoxínu Vykonáva všetky služby testovania, analýzy, merania, vyhodnocovania a generovania správ úplne a spoľahlivo.
Môžete nás požiadať, aby sme vyplnili náš formulár, aby sme dostali schôdzku, získali podrobnejšie informácie alebo požiadali o vyhodnotenie.
