Uji Endotoksin Bakteri

Bacterial Endotoxins Test (BET) adalah uji in vitro untuk deteksi dan kuantifikasi endotoksin bakteri, komponen dinding sel bakteri gram negatif. BET dilakukan sebagai bagian dari uji pelepasan batch untuk perangkat medis yang memiliki kontak langsung atau tidak langsung dengan sistem kardiovaskular, sistem limfatik, atau cairan serebrospinal. Produk farmasi yang dapat disuntikkan juga harus diuji untuk endotoksin bakteri. Pemantauan rutin sistem air dan material yang masuk dapat memastikan bahwa proses tersebut tidak menambahkan endotoksin ke produk akhir.

Eksperimen ini juga dikenal dengan tes Limulus Amebocyte Lysate (LAL) dan kadang-kadang disebut sebagai tes pirogen (karena endotoksin bakteri dapat menyebabkan demam pada mamalia, termasuk manusia). Namun, BET jangan disamakan dengan uji pirogen kelinci yang dijelaskan dalam bagian USP <151>.

Semua pengujian memenuhi persyaratan yang ditentukan dalam bagian USP <85>, bagian USP <161>, ANSI / AAMI ST72: 2011, EP 2.6.14, JP 4.01, dan Panduan FDA untuk Uji Pirogen dan Endotoksin Industri: Pertanyaan dan Jawaban.

EUROLABadalah pemimpin industri dalam pengujian endotoksin bakteri. Untuk pengujian rutin, hasilnya biasanya tersedia dalam waktu empat hari kerja setelah pengumpulan sampel. Validasi dan pengembangan metode kami dilakukan secara detail melalui proses yang terbukti efektif dan patuh. Dengan pengalaman lebih dari 25 tahun, kami dengan senang hati menjawab pertanyaan Anda mengenai kriteria pengujian dan juga dapat membantu dalam penyelidikan kesalahan dan evaluasi proses produksi.

Standar yang Berlaku

• USP 85
• USP 161
• USP 797
• AAMI ST72
• EP 2.6.14
• JP 4.01

Fitur Sampel

• LAL110: Disarankan minimal 3
• LAL140: lebih disukai 5 mL (minimal 1 mL)
• LAL150: Disarankan minimal 3
• LAL155: 1 sampel direkomendasikan
• LAL210: Disarankan minimal 3
• LAL610: Setidaknya 3 direkomendasikan; persiapan yang sudah mapan saja

Uji Bakteri Endotoksin dapat dilakukan dengan metode uji kinetik turbidimetri, kromogenik kinetik atau gel bekuan. Namun, metode uji kinetik memiliki keunggulan yang signifikan dibandingkan pengujian bekuan gel.

Ekstraksi sampel: Ekstraksi instrumen dilakukan menggunakan air yang bebas dari endotoksin yang terdeteksi. Proses ekstraksi melibatkan pembilasan dan/atau pencucian instrumen dengan jumlah cairan minimum untuk memastikan penghilangan yang tepat. Instrumen dengan jalur cairan non-pirogenik dihilangkan dengan membilas jalur cairan yang relevan dengan cairan ekstraksi yang dipanaskan hingga 37 ± 1 °C dan menghilangkan kontak selama tidak kurang dari satu jam. Perendaman instrumen dilakukan dengan membilas instrumen dalam cairan ekstraksi pada suhu 37-40 °C selama lebih dari 60 menit dengan pengadukan berkala menggunakan pengaduk orbital.

Prosedur pengujian: BET melibatkan analisis sampel cair atau ekstrak sampel menggunakan Limulus Amebocyte Lysate (LAL). LAL adalah reagen yang terbuat dari darah kepiting tapal kuda. Dengan adanya endotoksin bakteri, lisat bereaksi membentuk gumpalan atau, tergantung pada tekniknya, menyebabkan perubahan warna. Sampel uji dibandingkan dengan kurva standar yang dibuat dari konsentrasi endotoksin yang diketahui. Semua pengujian dilakukan setidaknya dua kali. Kontrol produk positif dan kontrol negatif disertakan sebagai bagian dari setiap pengujian.

Validasi: Perlu dibuktikan bahwa sampel uji tidak mengganggu kemampuan mendeteksi endotoksin. Hal ini dilakukan dengan kontrol produk positif (juga dikenal sebagai pemulihan spike) untuk metode pengujian kinetik dan percobaan inhibisi dan peningkatan terpisah untuk metode penggumpalan gel.

Sampel yang memerlukan proses seperti rekonstitusi, denaturasi panas, sentrifugasi, atau filtrasi dalam pelarut selain air harus divalidasi untuk menunjukkan bahwa perlakuan tersebut tidak mengakibatkan hilangnya endotoksin. Hal ini dilakukan dengan menginokulasi sampel dengan endotoksin dan memberikan sampel yang divaksinasi ke pengobatan yang dipilih.

Batas endotoksin untuk alat kesehatan tidak lebih dari 20.0 AU / alat jika alat tidak bersentuhan dengan cairan serebrospinal, dalam hal ini batasnya adalah 2.15 AU / alat. Implan mata dan OVD mungkin harus memenuhi batas bawah 0.2 AB / perangkat atau 0.2 AB / mL. Batasan endotoksin untuk produk farmasi didasarkan pada dosis maksimum yang dapat diberikan selama periode 1 jam.

EUROLAB, dengan tim yang sangat ahli dan laboratorium yang terakreditasi internasional, Uji Endotoksin Bakteri melakukan semua layanan pengujian, analisis, pengukuran, evaluasi, dan pembuatan laporan secara lengkap dan andal.