Tes Sitotoksisitas

Uji sitotoksisitas dirancang untuk menilai toksisitas umum perangkat dan bahan medis. Tes ini melibatkan ekstraksi perangkat dalam media kultur sel dan kemudian mengekspos cairan yang diekstraksi ke sel fibroblast tikus (L929).

Sel dibiarkan tumbuh dalam cairan yang diekstraksi untuk jangka waktu tertentu sebelum dievaluasi menggunakan metode kualitatif atau kuantitatif. Tes dilakukan pada semua perangkat medis yang bersentuhan dengan pasien, bahan baku dan perangkat dengan validasi pembersihan atau produksi residu.

Standar yang Berlaku

• ANSI/AAMI/ISO 10993-5
• ANSI/AAMI/ISO 10993-12

Fitur Sampel

• CTX101: 400 mm2 atau 2 gram; Ini harus dibagi menjadi 100 bagian, 100mm atau 3mg
• CTX110: 1 perangkat lengkap, masing-masing perangkat harus berukuran 120 cm2 atau 4 gram
• CTX112: Jumlah Sampel: 120 cm² atau 4 gram. Waktu Penyelesaian adalah 14 hari sejak penerimaan sampel.
• CTX115: 1 perangkat lengkap, masing-masing perangkat harus berukuran 120 cm2 atau 4 gram
• CTX116: Perangkat lengkap dengan luas permukaan = 60 cm2. Beberapa perangkat dapat dikelompokkan bersama untuk memberikan persyaratan luas permukaan minimum.
• CTX117: Perangkat lengkap dengan luas permukaan = 60 cm2. Beberapa perangkat dapat dikelompokkan bersama untuk memberikan persyaratan luas permukaan minimum.
• CTX125: 1 perangkat lengkap, masing-masing perangkat harus berukuran 120 cm2 atau 4 gram

Garis Besar Kerja untuk Pelapisan Sitotoksisitas / MEM / Agar

Elusi MEM
Alat / bahan biasanya diekstraksi pada suhu 37 ± 1ºC dalam media kultur sel mamalia (MEM) yang dilengkapi serum. Setelah ekstraksi, ekstrak dihubungi dengan lapisan tunggal sel L-929 (fibroblas tikus). Sel-sel tersebut kemudian dibiarkan tumbuh dalam cairan ekstraksi untuk jangka waktu tertentu sebelum dievaluasi menggunakan metode kualitatif atau kuantitatif.

kualitatif

Evaluasi kualitatif termasuk mengamati sel di bawah mikroskop dan menetapkan tingkat sitotoksik (0-4). Kelas tersebut didasarkan pada perkiraan persentase lisis (kematian) dan morfologi (penampilan) sel. Jika skor sitotoksik ≤ 2 (50% lisis), bahan tes lulus tes.

kuantitatif

Evaluasi kuantitatif menggunakan pewarna tetrazolium yang digunakan untuk mengevaluasi aktivitas metabolisme sel. Hasil dilaporkan sebagai persentase viabilitas (persentase sel yang layak). Bahan uji lulus uji jika persentase viabilitasnya 70%. Pengenceran ganda dari ekstrak zat uji biasanya disertakan dalam setiap pengujian.

Agar dibagikan
bahan biasanya diuji dengan luas permukaan minimal 100 mm. Ini juga dapat digunakan untuk cairan, gel atau bubuk dengan menggunakan berat setidaknya 100 mg per sumur. Bahan ditempatkan pada lembaran agarosa yang ditempatkan di atas lapisan tunggal sel L-929 dan diinkubasi pada suhu 24 ± 26 ° C dalam 37 ± 1% CO 5 selama 1 - 2 jam. Setelah inkubasi, zona kerusakan sel diukur dan diberi skor sesuai dengan skala 10993-5 yang tercantum dalam AAMI / ANSI / ISO 0-4. Jika respons sitotoksik tidak lebih besar dari grade 2 (agak reaktif), bahan tersebut memenuhi persyaratan ISO. Meskipun Agar Overlay adalah metode pengujian yang diterima secara historis, metode ini mungkin sesuai saat dikirimkan ke beberapa badan pengatur.

Kesalahan Sitotoksisitas

Kadang-kadang, perangkat atau bahan akan menunjukkan tingkat reaktivitas sitotoksik yang lebih tinggi daripada standar ANSI / AAMI / ISO 10993-5 dan akan menghasilkan tes yang gagal. Meskipun produk Anda gagal dalam uji sitotoksisitas, bukan berarti perangkat atau barang Anda tidak aman untuk penggunaan klinis. Ini berarti Anda harus mengidentifikasi sumber kesalahan dan menilai risiko toksikologi.

Pakar Kami Dapat Membantu

Ada beberapa kemungkinan penyebab kegagalan sitotoksisitas dan EUROLABmenyediakan layanan untuk membantu Anda mengidentifikasi dan mengevaluasi kesalahan. Dari sana, para ahli kami dapat mengevaluasi potensi risiko toksikologi terhadap keselamatan pasien.

Kami mengevaluasi materi dan proses yang terkait dengan perangkat. Berdasarkan informasi ini, para ahli kami akan sering merekomendasikan kimia analitik yang ditargetkan untuk menentukan penyebab kegagalan. Kami kemudian dapat bekerja dengan pelanggan untuk membenarkan kesalahan melalui pengujian dan evaluasi.

Sebuah diskusi dengan para ahli kami untuk mengidentifikasi penyebab kegagalan sitotoksisitas dan mengembangkan rencana tindakan membuat produsen berhasil mengirimkan perangkat mereka untuk persetujuan regulasi tanpa tindakan lebih lanjut.

EUROLAB, dengan tim yang sangat ahli dan laboratorium yang terakreditasi internasional, Tes Sitotoksisitas melakukan semua layanan pengujian, analisis, pengukuran, evaluasi, dan pembuatan laporan secara lengkap dan andal.