Las pruebas de citotoxicidad están diseñadas para evaluar la toxicidad general de los dispositivos y materiales médicos. La prueba implica extraer los dispositivos en un medio de cultivo celular y luego exponer el líquido extraído a células de fibroblastos de ratón (L929).
Se permite que las células crezcan en el líquido extraído durante un cierto período de tiempo antes de que las células se evalúen utilizando métodos cualitativos o cuantitativos. La prueba se realiza en todos los dispositivos médicos, materias primas y dispositivos con validación de limpieza o producción de residuos que entran en contacto con el paciente.
Elución de MEM
Los dispositivos / materiales se extraen normalmente a 37 ± 1ºC en medio de cultivo de células de mamífero (MEM) suplementado con suero. Después de la extracción, los extractos se ponen en contacto con una monocapa de células L-929 (fibroblastos de ratón). A continuación, se permite que las células crezcan en el fluido de extracción durante un período de tiempo específico antes de evaluarlas mediante métodos cualitativos o cuantitativos.
cualitativo
La evaluación cualitativa incluye la observación de las células al microscopio y la asignación de un grado citotóxico (0-4). El grado se basa en un porcentaje estimado de lisis (muerte) y morfología (apariencia) de las células. Si la puntuación citotóxica es ≤ 2 (50% de lisis), los materiales de prueba pasan la prueba.
cuantitativo
La evaluación cuantitativa utiliza un tinte de tetrazolio que se utiliza para evaluar la actividad metabólica de las células. Los resultados se informan como porcentaje de viabilidad (porcentaje de células viables). Los materiales de prueba pasan la prueba si el porcentaje de viabilidad es del 70%. Por lo general, en cada ensayo se incluyen múltiples diluciones del extracto de la sustancia de ensayo.
Agar compartido
Los materiales se prueban generalmente con una superficie de al menos 100 mm. También se puede utilizar para líquidos, geles o polvos con un peso de al menos 100 mg por pocillo. El material se coloca en una hoja de agarosa que se coloca sobre una monocapa de células L-929 y se incuba a 24 ± 26 ° C en 37 ± 1% de CO5 durante 1 a 2 horas. Después de la incubación, la zona de destrucción celular se mide y se califica con la escala de 10993 a 5 indicada en AAMI / ANSI / ISO 0-4. Si la respuesta citotóxica no es mayor que el grado 2 (levemente reactivo), el material cumple con los requisitos de ISO. Aunque el Agar Overlay es un método de prueba aceptado históricamente, puede ser apropiado cuando se envía a algunas agencias reguladoras.
Errores de citotoxicidad
Ocasionalmente, un dispositivo o material exhibirá un nivel más alto de reactividad citotóxica que lo que permite la norma ANSI / AAMI / ISO 10993-5 y resultará en una prueba fallida. Incluso si su producto no pasó la prueba de citotoxicidad, no significa que su dispositivo o artículo no sea seguro para uso clínico. Esto simplemente significa que debe identificar la fuente del error y evaluar los riesgos toxicológicos.
Nuestros expertos pueden ayudar
Hay varias causas posibles del fracaso de la citotoxicidad y EUROLABproporciona servicios para ayudarle a identificar y evaluar el error. A partir de ahí, nuestros expertos pueden evaluar los riesgos toxicológicos potenciales para la seguridad del paciente.
Evaluamos los materiales y procesos asociados al dispositivo. Con base en esta información, nuestros expertos a menudo recomendarán una química analítica específica para determinar la causa de la falla. Luego, podemos trabajar con los clientes para justificar el error mediante pruebas y evaluación.
Una discusión con nuestros expertos para determinar la causa de la falla de citotoxicidad y desarrollar un plan de acción lleva a los fabricantes a enviar con éxito sus dispositivos para aprobación regulatoria sin más acciones.
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