Testes de Citotoxicidade

O teste de citotoxicidade é projetado para avaliar a toxicidade geral de dispositivos e materiais médicos. O teste envolve a extração dos dispositivos em um meio de cultura de células e, em seguida, a exposição do fluido extraído às células de fibroblastos de camundongo (L929).

As células podem crescer no fluido extraído por um certo período de tempo antes de serem avaliadas usando métodos qualitativos ou quantitativos. O teste é realizado em todos os dispositivos médicos, matérias-primas e dispositivos com validação de limpeza ou produção de resíduos que entram em contato com o paciente.

Normas aplicáveis

• ANSI/AAMI/ISO 10993-5
• ANSI/AAMI/ISO 10993-12

Recursos de exemplo

• CTX101: 400 mm2 ou 2 gramas; Deve ser dividido em 100 partes, 100mm ou 3mg
• CTX110: 1 dispositivo completo, cada dispositivo deve ter 120 cm2 ou 4 gramas
• CTX112: Quantidade da amostra: 120 cm² ou 4 gramas. O tempo de retorno é de 14 dias a partir do recebimento da amostra.
• CTX115: 1 dispositivo completo, cada dispositivo deve ter 120 cm2 ou 4 gramas
• CTX116: Um dispositivo completo com uma área de superfície = 60 cm2. Vários dispositivos podem ser agrupados para fornecer um requisito mínimo de área de superfície.
• CTX117: Um dispositivo completo com uma área de superfície = 60 cm2. Vários dispositivos podem ser agrupados para fornecer um requisito mínimo de área de superfície.
• CTX125: 1 dispositivo completo, cada dispositivo deve ter 120 cm2 ou 4 gramas

Esboços de Trabalho para Citotoxicidade / MEM / Agar Plating

MEM Elution
Dispositivos / materiais são geralmente extraídos a 37 ± 1ºC em meio de cultura de células de mamíferos suplementado com soro (MEM). Após a extração, os extratos são colocados em contato com uma monocamada de células L-929 (fibroblastos de camundongo). As células são então permitidas a crescer no fluido de extração por um período de tempo especificado antes de serem avaliadas usando métodos qualitativos ou quantitativos.

qualitativo

A avaliação qualitativa inclui a observação das células ao microscópio e a atribuição de um grau de citotoxicidade (0-4). O grau é baseado em uma porcentagem estimada de lise (morte) e morfologia (aparência) das células. Se a pontuação citotóxica for 2 (50% de lise), os materiais de teste passam no teste.

quantitativo

A avaliação quantitativa usa um corante de tetrazólio usado para avaliar a atividade metabólica das células. Os resultados são relatados como porcentagem de viabilidade (porcentagem de células viáveis). Os materiais de teste passam no teste se a porcentagem de viabilidade for 70%. Diluições múltiplas do extrato da substância de teste são geralmente incluídas em cada teste.

Agar compartilhado
os materiais são geralmente testados com uma área de superfície de pelo menos 100 mm. Também pode ser usado para líquidos, géis ou pós com peso de pelo menos 100 mg por poço. O material é colocado em uma placa de agarose que é colocada no topo de uma monocamada de células L-929 e incubada a 24 ± 26 ° C em 37 ± 1% de CO 5 por 1-2 horas. Após a incubação, a zona de destruição celular é medida e pontuada na escala 10993-5 listada em AAMI / ANSI / ISO 0-4. Se a resposta citotóxica não for maior que grau 2 (moderadamente reativa), o material atende aos requisitos ISO. Embora a camada de ágar seja um método de teste historicamente aceito, pode ser apropriado ao enviar para algumas agências regulatórias.

Erros de citotoxicidade

Ocasionalmente, um dispositivo ou material exibirá um nível mais alto de reatividade citotóxica do que o permitido pelo padrão ANSI / AAMI / ISO 10993-5 e resultará em um teste reprovado. Mesmo que o seu produto tenha falhado no teste de citotoxicidade, isso não significa que o seu dispositivo ou item seja inseguro para uso clínico. Isso significa simplesmente que você deve identificar a origem do erro e avaliar quaisquer riscos toxicológicos.

Nossos especialistas podem ajudar

Existem várias causas possíveis de falha na citotoxicidade e EUROLABfornece serviços para ajudá-lo a identificar e avaliar o erro. A partir daí, nossos especialistas podem avaliar potenciais riscos toxicológicos para a segurança do paciente.

Avaliamos os materiais e processos associados ao dispositivo. Com base nessas informações, nossos especialistas costumam recomendar química analítica direcionada para determinar a causa da falha. Podemos então trabalhar com os clientes para justificar o erro por meio de testes e avaliação.

Uma discussão com nossos especialistas para identificar a causa da falha de citotoxicidade e desenvolver um plano de ação leva os fabricantes a enviarem seus dispositivos com sucesso para aprovação regulatória sem outras ações.

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