Zytotoxizitätstests

Der Zytotoxizitätstest dient der Beurteilung der Gesamttoxizität medizinischer Geräte und Materialien. Der Test umfasst die Extraktion von Geräten in einem Zellkulturmedium und die anschließende Exposition der Extraktflüssigkeit gegenüber Maus-Fibroblastenzellen (L929).

Man lässt die Zellen für einen bestimmten Zeitraum in der Extraktflüssigkeit wachsen, bevor die Zellen mit qualitativen oder quantitativen Methoden bewertet werden. Der Test wird an allen Medizinprodukten, Rohstoffen und Geräten durchgeführt, die für die Reinigung validiert sind oder Rückstände im Kontakt mit dem Patienten produzieren.

Anwendbare Standards

• ANSI/AAMI/ISO 10993-5
• ANSI/AAMI/ISO 10993-12

Beispielfunktionen

• CTX101: 400 mm2 oder 2 Gramm; Es sollte in 100 Teile geteilt werden, 100 mm oder 3 mg
• CTX110: 1 komplettes Gerät, jedes Gerät sollte 120 cm2 oder 4 Gramm groß sein
• CTX112: Probenmenge: 120 cm² oder 4 Gramm. Die Bearbeitungszeit beträgt 14 Tage ab Erhalt der Probe.
• CTX115: 1 komplettes Gerät, jedes Gerät sollte 120 cm2 oder 4 Gramm groß sein
• CTX116: Ein komplettes Gerät mit einer Oberfläche = 60 cm2. Es können mehrere Geräte zusammengefasst werden, um eine minimale Oberflächenanforderung bereitzustellen.
• CTX117: Ein komplettes Gerät mit einer Oberfläche = 60 cm2. Es können mehrere Geräte zusammengefasst werden, um eine minimale Oberflächenanforderung bereitzustellen.
• CTX125: 1 komplettes Gerät, jedes Gerät sollte 120 cm2 oder 4 Gramm groß sein

Arbeitspläne für die Zytotoxizität / MEM / Agar-Beschichtung

MEM-Elution
Geräte/Materialien werden normalerweise in mit Serum angereichertem Säugetierzellkulturmedium (MEM) bei 37 ± 1 °C extrahiert. Nach der Extraktion werden die Extrakte mit einer Monoschicht aus L-929-Zellen (Mausfibroblasten) in Kontakt gebracht. Anschließend lässt man die Zellen für einen bestimmten Zeitraum in der Extraktionsflüssigkeit wachsen, bevor sie mit qualitativen oder quantitativen Methoden bewertet werden.

qualitativ

Die qualitative Bewertung umfasst die Beobachtung von Zellen unter einem Mikroskop und die Zuweisung eines zytotoxischen Grades (0-4). Der Grad basiert auf einer geschätzten prozentualen Lyse (Tod) und Morphologie (Aussehen) der Zellen. Wenn der zytotoxische Score ≤ 2 ist (50% Lyse), bestehen die Testmaterialien den Test.

quantitativ

Bei der quantitativen Bewertung wird ein Tetrazoliumfarbstoff verwendet, der zur Bewertung der Stoffwechselaktivität von Zellen verwendet wird. Die Ergebnisse sind als prozentuale Lebensfähigkeit (Prozentsatz lebensfähiger Zellen) angegeben. Testmaterialien bestehen den Test, wenn der Prozentsatz der Lebensfähigkeit 70% beträgt. In jedem Test sind normalerweise Mehrfachverdünnungen des Testsubstanzextrakts enthalten.

Agar geteilt
Die Materialien werden in der Regel mit einer Oberfläche von mindestens 100 mm geprüft. Das Gewicht kann auch für Flüssigkeiten, Gele oder Pulver verwendet werden, wobei mindestens 100 mg pro Vertiefung verwendet werden müssen. Das Material wird auf ein Agaroseblatt gelegt, das auf einer Monoschicht aus L-929-Zellen liegt, und 24–26 Stunden lang in 37 % ± 1 % CO bei 5 ± 1 °C inkubiert. Nach der Inkubation wird die Zellzerstörungsstelle gemessen und gemäß der in AAMI / ANSI / ISO 2-10993 aufgeführten Skala von 5 bis 0 bewertet. Wenn die zytotoxische Reaktion nicht größer als Grad 4 (leicht reaktiv) ist, erfüllt das Material die ISO-Anforderungen. Obwohl Agar Overlay in der Vergangenheit eine anerkannte Testmethode war, kann es bei der Einreichung bei einigen Aufsichtsbehörden angemessen sein.

Zytotoxizitätsfehler

Gelegentlich weist ein Gerät oder Material ein höheres Maß an zytotoxischer Reaktivität auf, als die Norm ANSI/AAMI/ISO 10993-5 zulässt, was zu einem fehlgeschlagenen Test führt. Auch wenn Ihr Produkt den Zytotoxizitätstest nicht bestanden hat, bedeutet das nicht, dass Ihr Gerät oder Material für den klinischen Einsatz unsicher ist. Es bedeutet lediglich, dass Sie die Fehlerquelle identifizieren und etwaige toxikologische Risiken bewerten müssen.

Unsere Experten können helfen

Es gibt mehrere mögliche Ursachen für ein Versagen der Zytotoxizität EUROLABbietet Dienstleistungen an, die Sie bei der Identifizierung und Bewertung des Fehlers unterstützen. Von dort aus können unsere Experten potenzielle toxikologische Risiken für die Patientensicherheit bewerten.

Wir bewerten die mit dem Gerät verbundenen Materialien und Prozesse. Basierend auf diesen Informationen empfehlen unsere Experten häufig eine gezielte analytische Chemie, um die Fehlerursache zu bestimmen. Wir können dann mit Kunden zusammenarbeiten, um den Fehler durch Testen und Auswerten zu rechtfertigen.

Eine Diskussion mit unseren Experten zur Ermittlung der Ursache für das Versagen der Zytotoxizität und zur Entwicklung eines Aktionsplans führt dazu, dass Hersteller ihre Geräte ohne weitere Maßnahmen erfolgreich zur behördlichen Zulassung einreichen können.

EUROLABmit seinem hochqualifizierten Team und international akkreditierten Laboren, Zytotoxizitätstests führt alle Test-, Analyse-, Mess-, Bewertungs- und Berichterstellungsdienste vollständig und zuverlässig durch.