AOAC 991.43 Общее, растворимое и нерастворимое содержание пищевых волокон в пищевых продуктах — ферментативно-гравиметрический метод MES-TRIS Buffler A

Согласно стандарту «AOAC 991.43 Общее, растворимое и нерастворимое содержание пищевых волокон в пищевых продуктах — ферментативно-гравиметрический метод MES-TRIS Bufler A», разработанному Официальной ассоциацией аналитических химиков (AOAC), два образца сухих пищевых продуктов (обезжиренных, если содержание жира превышает 10%) подвергаются последовательному ферментативному расщеплению с использованием термостойкой α-амилазы, протеазы и амилоглюкозидазы для удаления крахмала и белка. Для определения общего содержания пищевых волокон продукт ферментативного расщепления обрабатывается спиртом для осаждения растворимых пищевых волокон перед фильтрацией, а остаток общего содержания пищевых волокон промывается спиртом и ацетоном, высушивается и взвешивается. Для определения нерастворимых и растворимых пищевых волокон продукт ферментативного расщепления фильтруется, а остаточные нерастворимые пищевые волокна промываются теплой водой, высушиваются и взвешиваются. Для определения растворимых пищевых волокон объединенный фильтр и остаток осаждаются спиртом, фильтруются, высушиваются и взвешиваются. Остаточные значения общего содержания пищевых волокон, нерастворимых и растворимых пищевых волокон корректируются с учетом белка, золы и пустого пространства.

В испытаниях используется следующее оборудование:

• Стаканы: 400 или 600 мл (в любом формате).
• Фильтрационный тигель: спеченный диск, крупнозернистый, размер пор ASTM 40-60 Hm, 60 мл, из пирекса. Подготовка тиглей следующая: их сжигают в зольном котле при температуре 525 градусов в течение ночи. Перед извлечением тиглей температуру печи снижают ниже 130 градусов. Затем тигли оставляют замачиваться в 2%-ном растворе для очистки при комнатной температуре в течение 1 часа.

Тигли промывают обычной водой, а затем деионизированной водой. Для окончательной промывки используют 15 мл ацетона, после чего их высушивают на воздухе. В сухие тигли добавляют приблизительно 1,0 г цеолита и сушат при температуре 130 градусов до постоянной массы. Тигель охлаждают в осушителе в течение приблизительно 1 часа, и массу тигля с цеолитом записывают с точностью до 0,1 мг.

• Вакуумная система: вакуумный насос или аспиратор с регулирующим устройством. Толстостенная фильтровальная бутылка объемом 1 л с боковыми отводами. Резиновые кольцевые адаптеры для использования с фильтрами. Маски.
• Термостаты с функцией перемешивания: Благодаря автоматическому таймеру включения/выключения, они могут поддерживать температуру в пределах 98 градусов плюс-минус 2 градуса. Постоянную температуру можно установить на уровне 60 градусов.
• Весы: аналитические, точность ± 0,1 мг.
• Муфельная печь: способна поддерживать температуру 525 градусов плюс-минус 5 градусов.
• Духовка: может поддерживать температуру от 105 до 130 градусов Цельсия с погрешностью ±3 градуса.
• Осушитель: диоксид кремния или эквивалентный осушитель. Каждые две недели осушитель просушивают в течение ночи при температуре 130 градусов.
• pH-метр: с температурной компенсацией, значения pH стандартизированы с помощью буферных растворов с концентрациями 4,0, 7,0 и 10,0.
• Пипетки: с одноразовыми наконечниками. Объем 100-300 мкл и 5 мл.
• Дистрибьюторы.
• Магнитные мешалки и мешалки.

Стандарт AOAC 991.43 является одним из наиболее широко признанных и исторически значимых формальных методов определения пищевых волокон в продуктах питания. С момента его первой публикации в 1991 году этот метод стал краеугольным камнем анализа пищевых волокон. До принятия этого стандарта пищевые волокна обычно измерялись только как сырые волокна. Метод, описанный в стандарте AOAC 920.86, значительно недооценивал истинное содержание пищевых волокон, улавливая лишь небольшую долю целлюлозы и лигнина, теряя при этом большую часть гемицеллюлозы, пектина, камеди и резистентного крахмала.

Стандарт AOAC 991.43 был разработан для обеспечения более физиологически точного измерения, которое лучше отражает то, что фактически сопротивляется перевариванию в тонком кишечнике человека (физиологическое определение пищевых волокон), и стал основой для значений пищевых волокон на миллионах этикеток продуктов питания по всему миру.

Данный метод использует сочетание ферментативного расщепления и гравиметрического определения:

• Подготовка образцов: Двойные тест-образцы желатинизируют с помощью термостойкой α-амилазы.
• Ферментативное переваривание: ферменты протеаза (для удаления белка) и амилоглюкоза (для гидролиза усваиваемого крахмала до глюкозы) имитируют условия пищеварения человека (pH, температура и продолжительность, аналогичные условиям во рту, желудке и тонком кишечнике).
• Осаждение пищевых волокон: для осаждения растворимых полимеров пищевых волокон и удаления переваренных веществ добавляют этанол (4 объема).
• Фильтрация и промывка: остаток (содержащий общее количество пищевых волокон) фильтруют, промывают этанолом и ацетоном, высушивают и взвешивают.
• Коррекция на белок и золу: Одна пара образцов анализируется на остаточный белок, другая — на золу; эти значения вычитаются для получения скорректированного общего количества пищевых волокон.
• Дополнительное разделение растворимых и нерастворимых волокон: перед осаждением этанолом продукт пищеварения можно отфильтровать. Остаток после фильтрации = нерастворимые пищевые волокна. Затем фильтрат осаждают этанолом для выделения растворимых пищевых волокон. Общее количество пищевых волокон = Нерастворимые пищевые волокна + Растворимые пищевые волокна.

Основные характеристики данного метода следующие:

• Он измеряет как растворимую, так и нерастворимую пищевую клетчатку.
• В его состав входит резистентный крахмал, устойчивый к ферментативному расщеплению.
• DP содержит большинство неперевариваемых олигосахаридов, причем самые низкоуглеводные из них входят в десятку наиболее углеводных (поскольку они выпадают в осадок в 78% этаноле).
• Метод DP исключает неперевариваемые олигосахариды 3-9, для которых требуются отдельные методы.

Преимущества этого метода заключаются в следующем:

• Относительно простое оборудование (ВЭЖХ не требуется).
• Надежные и воспроизводимые результаты в разных лабораториях.
• Подробные данные валидации и результаты межлабораторных исследований.
• Он измеряет физиологически значимые волокна.

Текущее практическое применение:

• Этот метод до сих пор используется в качестве эталонного во многих странах, которые не приняли новое определение Кодекса/FDA.
• Этот метод часто используется в исследованиях при сравнении исторических данных.
• Новые методы, в которых различия минимальны, предпочитают многие лаборатории для анализа зерновых продуктов, овощей и традиционных продуктов с высоким содержанием клетчатки.

На протяжении многих лет наша организация, располагающая компетентным и опытным персоналом, понимает потребности своих клиентов, предоставляет им необходимые передовые услуги по тестированию и оказывает помощь в создании, внедрении и совершенствовании систем управления. В рамках этой деятельности мы также предоставляем предприятиям услуги по тестированию в соответствии со стандартом «AOAC 991.43 Общее, растворимое и нерастворимое пищевое волокно в продуктах питания — ферментативно-гравиметрический метод MES-TRIS Bufler A».