AOAC 991.43 Вкупно, растворливи и нерастворливи диететски влакна во храната - Ензимско-гравиметриски метод MES-TRIS Bufler A

Според стандардот „AOAC 991.43 Вкупно, растворливи и нерастворливи диететски влакна во храната - Ензимско-гравиметриски метод MES-TRIS Bufler A“ развиен од Официјалното здружение на аналитички хемичари (AOAC), по два примерока од сушена храна (обезмастена ако содржи повеќе од 10% масти) се подложени на секвенцијално ензимско варење со отпорна на топлина α-амилаза, протеаза и амилоглукозидаза за отстранување на скроб и протеини. За вкупните диететски влакна, производот од ензимското варење се третира со алкохол за да се таложи растворливото диететско влакно пред филтрација, а вкупниот остаток од диететски влакна се мие со алкохол и ацетон, се суши и се мери. За нерастворливи и растворливи диететски влакна, производот од ензимското варење се филтрира, а преостанатите нерастворливи диететски влакна се мијат со топла вода, се сушат и се мери. За растворливи диететски влакна, комбинираниот филтер и остаток се таложи со алкохол, се филтрира, се суши и се мери. Вкупните преостанати вредности на диететските влакна, нерастворливите и растворливите диететски влакна се корегираат за протеини, пепел и празен простор.

Во тестовите се користи следната опрема:

• Чаши: 400 или 600 мл (во која било форма).
• Сад за филтрирање: Синтеруван диск, грубо зрнет, ASTM 40-60 Hm големина на порите, 60 mL Pyrex. Се подготвува на следниов начин: Се гори преку ноќ во печка за пепел на 525 степени. Пред да се отстранат садниците, температурата на печката се намалува под 130 степени. Потоа садниците се оставаат да отстојат во 2% раствор за чистење на собна температура 1 час.

Садовите за готвење се исплакнуваат со обична вода, а потоа со дејонизирана вода. За последното плакнење се користат 15 mL ацетон, а потоа се сушат на воздух. Приближно 1,0 g целит се додава во сувите садници и се суши на 130 степени до константна тежина. Садот за готвење се лади во десикант приближно 1 час, а тежината на садот плус целит се евидентира со точност од 0,1 mg.

• Вакуумски систем: Вакуум пумпа или аспиратор со уред за регулирање. Филтер шише од 1 литар со дебели ѕидови и странични рачки. Адаптери со гумени прстени за употреба со филтрација. Маски.
• Водени бањи со тресење: Со автоматски тајмер за вклучување/исклучување, може да одржува температура од 98 степени плус/минус 2 степени. Константна температура може да се постави на 60 степени.
• Баланс: Аналитички, точност плус/минус 0,1 мг.
• Муфлена рерна: Може да одржува температура од 525 степени плус/минус 5 степени.
• Рерна: Може да одржува температури помеѓу 105 и 130 степени Целзиусови плус/минус 3 степени.
• Десикант: Силициум диоксид или еквивалентен десикант. На секои две недели, десикантот се суши преку ноќ на 130 степени.
• pH мерач: Температурно компензиран, pH вредности стандардизирани со пуферски раствори од 4, 0, 7, 0 и 10, 0.
• Пипети: Со врвови за еднократна употреба. 100-300 µL и капацитет од 5 mL.
• Дистрибутери.
• Магнетни мешалки и стапчиња за мешање.

Стандардот AOAC 991.43 е еден од најшироко признатите и историски значајни формални методи за одредување на диететски влакна во храната. Од неговото првично објавување во 1991 година, овој метод е камен-темелник на анализата на диететските влакна. Пред овој стандард, диететските влакна генерално се мереле само како сурови влакна. Методот опишан во стандардот AOAC 920.86 сериозно ја потцени вистинската содржина на диететски влакна, опфаќајќи само мал дел од целулоза и лигнин, додека губеше поголем дел од хемицелулоза, пектин, гума и отпорен скроб.

Стандардот AOAC 991.43 е развиен за да обезбеди физиолошки попрецизно мерење кое подобро го одразува она што всушност се спротивставува на варењето во тенкото црево на човекот (физиолошка дефиниција на диететски влакна) и стана основа за вредностите на диететските влакна на милиони етикети за исхрана низ целиот свет.

Овој метод користи комбинација од ензимско варење и гравиметриско одредување:

• Подготовка на примерокот: Двојните тест примероци се желатинизираат со α-амилаза отпорна на топлина.
• Ензимско варење: Ензимите протеаза (за отстранување на протеини) и амилоглукоза (за хидролизирање на сварливиот скроб во гликоза) симулираат човечки дигестивни услови (pH, температура и времетраење слични на оние во устата, желудникот и тенкото црево).
• Таложење на диететски влакна: Се додава етанол (4 волумени) за да се таложат растворливите полимери на диететски влакна и да се отстранат сварените супстанции.
• Филтрирање и миење: Остатокот (кој содржи вкупни диететски влакна) се филтрира, се мие со етанол и ацетон, се суши и се мери.
• Корекција на протеини и пепел: Едниот пар примероци се анализира за преостанати протеини, а другиот за пепел; овие се одземаат за да се добие коригираната вкупна количина на диететски влакна.
• Опционално одвојување на растворливи и нерастворливи влакна: Пред таложењето на етанолот, дигестивниот производ може да се филтрира. Остатокот што останува по филтрацијата = нерастворливи диететски влакна. Филтратот потоа се таложи со етанол за да се обноват растворливи диететски влакна. Вкупно диететски влакна = нерастворливи диететски влакна + растворливи диететски влакна.

Основните карактеристики на овој метод се како што следува:

• Ги мери и растворливите и нерастворливите диететски влакна.
• Содржи отпорен скроб кој е отпорен на ензимско варење.
• ДП содржи најголем дел од несварливите олигосахариди, а најниските се првите 10 (бидејќи се таложат во 78% етанол).
• ДП ги исклучува несварливите олигосахариди 3-9, за кои се потребни посебни методи.

Предностите на овој метод се како што следува:

• Релативно едноставна опрема (не е потребна HPLC).
• Робусни и репродуцибилни резултати низ лабораториите.
• Сеопфатни податоци за валидација и меѓулабораториски студии.
• Ги мери физиолошки релевантните влакна.

Тековна практична употреба:

• Сè уште се користи како референтен метод во многу земји кои не ја усвоиле новата дефиниција на Codex/FDA.
• Често се користи во истражувањата при споредување на историски податоци.
• Новите методи, каде што разликите се минимални, се претпочитаат од многу лаборатории за житни производи, зеленчук и традиционална храна богата со растителни влакна.

Со години, нашата организација, со својот компетентен и искусен персонал, ги разбира потребите на своите клиенти, обезбедувајќи им напредни услуги за тестирање што им се потребни и помагајќи во воспоставувањето, имплементацијата и подобрувањето на системите за управување. Во оваа рамка, ние исто така нудиме услуги за тестирање на бизниси во согласност со стандардот „AOAC 991.43 Вкупно, растворливи и нерастворливи диететски влакна во храната - Ензимско-гравиметриски метод MES-TRIS Bufler A“.