AOAC 991.43 Serat Diet Total, Larut dan Tidak Larut dalam Makanan - Kaedah Enzimatik-Gravimetrik MES-TRIS Bufler A

Menurut piawaian “AOAC 991.43 Jumlah, serat makanan larut dan tidak larut dalam makanan - Kaedah enzimatik-gravimetrik MES-TRIS Bufler A” yang dibangunkan oleh Persatuan Rasmi Ahli Kimia Analisis (AOAC), dua sampel setiap makanan kering (dinyahlemak jika mengandungi lebih daripada 10% lemak) tertakluk kepada pencernaan enzimatik berjujukan dengan α-amilase, protease dan amiloglukosidase tahan haba untuk menyingkirkan kanji dan protein. Untuk jumlah serat makanan, produk pencernaan enzim dirawat dengan alkohol untuk memendakkan serat makanan larut sebelum penapisan, dan jumlah sisa serat makanan dibasuh dengan alkohol dan aseton, dikeringkan dan ditimbang. Untuk serat makanan tidak larut dan larut, produk pencernaan enzim ditapis dan sisa serat makanan tidak larut dibasuh dengan air suam, dikeringkan dan ditimbang. Untuk serat makanan larut, penapis dan sisa gabungan dimendakkan dengan alkohol, ditapis, dikeringkan dan ditimbang. Nilai sisa jumlah serat makanan, serat makanan tidak larut dan larut dibetulkan untuk protein, abu dan ruang kosong.

Peralatan berikut digunakan dalam ujian:

• Bikar: 400 atau 600 mL (dalam sebarang bentuk).
• Pijar penapisan: Cakera sinter, berbutir kasar, saiz liang ASTM 40-60 Hm, 60 mL Pyrex. Ia disediakan seperti berikut: Ia dibakar semalaman dalam relau abu pada suhu 525 darjah. Sebelum mengeluarkan pijar, suhu relau dibenarkan menurun di bawah 130 darjah. Pijar kemudian dibiarkan direndam dalam larutan pembersih 2% pada suhu bilik selama 1 jam.

Mangkuk pijar dibilas dengan air biasa dan kemudian dengan air ternyahion. 15 mL aseton digunakan untuk bilasan terakhir, dan kemudian dikeringkan di udara. Kira-kira 1,0 g Celite ditambah ke dalam mangkuk pijar kering dan dikeringkan pada suhu 130 darjah hingga mencapai berat yang malar. Mangkuk pijar disejukkan dalam pengering selama kira-kira 1 jam, dan berat mangkuk pijar ditambah Celite direkodkan kepada 0,1 mg terdekat.

• Sistem vakum: Pam vakum atau aspirator dengan peranti pengatur. Botol penapis 1 L berdinding tebal dengan lengan sisi. Penyesuai cincin getah untuk digunakan dengan penapisan. Topeng muka.
• Mandian air bergoncang: Dengan pemasa hidup/mati automatik, ia boleh mengekalkan suhu 98 darjah tambah/tolak 2 darjah. Suhu malar boleh ditetapkan kepada 60 darjah.
• Penimbang: Analitikal, ketepatan tambah/tolak 0,1 mg.
• Ketuhar muffle: Boleh mengekalkan suhu 525 darjah tambah/tolak 5 darjah.
• Ketuhar: Boleh mengekalkan suhu antara 105 dan 130 darjah Celsius tambah/tolak 3 darjah.
• Bahan pengering: Silikon dioksida atau bahan pengering yang setara. Setiap dua minggu, bahan pengering dikeringkan semalaman pada suhu 130 darjah.
• Meter pH: Suhu yang dikompensasikan, nilai pH diseragamkan dengan larutan penimbal 4, 0, 7, 0 dan 10, 0.
• Pipet: Dengan hujung pakai buang. Kapasiti 100-300 µL dan 5 mL.
• Pengedar.
• Pengacau magnet dan rod pengacau.

Piawaian AOAC 991.43 merupakan salah satu kaedah formal yang paling banyak diiktiraf dan penting dari segi sejarah untuk menentukan serat diet dalam makanan. Sejak penerbitan awalnya pada tahun 1991, kaedah ini telah menjadi asas analisis serat diet. Sebelum piawaian ini, serat diet pada amnya diukur hanya sebagai serat mentah. Kaedah yang diterangkan dalam piawaian AOAC 920.86 sangat meremehkan kandungan serat diet sebenar, hanya menangkap sebahagian kecil selulosa dan lignin sambil kehilangan sebahagian besar hemiselulosa, pektin, gam dan kanji tahan.

Piawaian AOAC 991.43 telah dibangunkan untuk memberikan ukuran yang lebih tepat secara fisiologi yang mencerminkan dengan lebih baik apa yang sebenarnya menentang pencernaan dalam usus kecil manusia (definisi fisiologi serat diet), dan telah menjadi asas untuk nilai serat diet pada berjuta-juta label nutrisi di seluruh dunia.

Kaedah ini menggunakan gabungan pencernaan enzimatik dan penentuan gravimetri:

• Penyediaan sampel: Sampel ujian berganda digelatinkan dengan α-amilase tahan haba.
• Penghadaman enzimatik: Enzim protease (untuk menyingkirkan protein) dan amiloglukosa (untuk menghidrolisis kanji yang boleh dicerna menjadi glukosa) mensimulasikan keadaan penghadaman manusia (pH, suhu dan tempoh yang serupa dengan keadaan di dalam mulut, perut dan usus kecil).
• Pemendakan serat diet: Etanol (4 jilid) ditambah untuk memendakkan polimer serat diet larut dan menyingkirkan bahan yang telah dihadam.
• Penapisan dan pencucian: Sisa (yang mengandungi jumlah serat diet) ditapis, dibasuh dengan etanol dan aseton, dikeringkan, dan ditimbang.
• Pembetulan protein dan abu: Sepasang sampel dianalisis untuk protein sisa, dan sepasang lagi untuk abu; jumlah ini ditolak untuk mendapatkan jumlah serat diet yang telah dibetulkan.
• Pengasingan pilihan serat larut dan tak larut: Sebelum pemendakan etanol, produk pencernaan boleh ditapis. Sisa yang tinggal selepas penapisan = serat diet tak larut. Filtrat kemudiannya dimendapkan dengan etanol untuk mendapatkan semula serat diet larut. Jumlah serat diet = Serat diet tak larut + serat diet larut.

Ciri-ciri asas kaedah ini adalah seperti berikut:

• Ia mengukur kedua-dua serat diet larut dan tidak larut.
• Ia mengandungi kanji tahan yang tahan terhadap pencernaan enzimatik.
• DP mengandungi kebanyakan oligosakarida yang tidak boleh dicerna, yang terendah ialah 10 teratas (kerana ia termendak dalam 78% etanol).
• DP tidak termasuk oligosakarida 3-9 yang tidak boleh dicerna, yang memerlukan kaedah berasingan.

Kelebihan kaedah ini adalah seperti berikut:

• Peralatan yang agak mudah (HPLC tidak diperlukan).
• Keputusan yang kukuh dan boleh dihasilkan semula merentasi makmal.
• Data pengesahan yang komprehensif dan kajian antara makmal.
• Ia mengukur gentian yang berkaitan secara fisiologi.

Kegunaan praktikal semasa:

• Ia masih digunakan sebagai kaedah rujukan di banyak negara yang belum menerima pakai definisi Codex/FDA yang baharu.
• Ia kerap digunakan dalam penyelidikan apabila membandingkan data sejarah.
• Kaedah baharu, yang perbezaannya minimum, lebih disukai oleh banyak makmal untuk produk bijirin, sayur-sayuran dan makanan serat tinggi tradisional.

Selama bertahun-tahun, organisasi kami, dengan kakitangannya yang cekap dan berpengalaman, telah memahami keperluan pelanggannya, menyediakan perkhidmatan ujian lanjutan yang mereka perlukan, dan membantu dalam penubuhan, pelaksanaan dan penambahbaikan sistem pengurusan. Dalam rangka kerja ini, kami juga menyediakan perkhidmatan ujian kepada perniagaan mengikut piawaian "AOAC 991.43 Serat diet larut dan tidak larut dalam makanan - Kaedah enzimatik-gravimetrik MES-TRIS Bufler A".